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一、試驗原理：
本產(chǎn)品符合GB 4789.28-2024 《食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 培養基和試劑的質(zhì)量要求》。
胰胨、多價(jià)胨和酵母膏提供氮源、維生素和生長(cháng)因子；李斯特氏菌可耐受較高含量的氯化鈉，同時(shí)對部分雜菌起抑制作用；磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉為緩沖劑；七葉苷為可發(fā)酵的糖類(lèi)；萘啶酮酸和吖啶黃為選擇性抑菌劑，抑制非李斯特氏菌的生長(cháng)。
二、培養基配方（g/L）：
|
胰胨 |
5.0 |
|
多價(jià)胨 |
5.0 |
|
酵母膏 |
5.0 |
|
氯化鈉 |
20.0 |
|
磷酸氫二鉀 |
12.0 |
|
磷酸二氫鉀 |
1.4 |
|
七葉苷 |
1.0 |
|
pH 7.3±0.1 25℃ |
|
三、試驗方法：
粉體裝培養基的使用：
1. 稱(chēng)取本品49.4g， 加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中，分裝， 121℃高壓滅菌15分鐘，冷卻后備用。LB1液：每225ml培養基中加入1支萘啶酮酸（5.0mg/支）和1支吖啶黃素（3.0mg/支）
2. 在無(wú)菌條件下分裝試管，每支試管10ml。
3. 制備質(zhì)控菌液。
4. 目標菌的接種。
接種10CFU~100CFU的單核細胞增生李斯特氏菌，接種體積不超過(guò)1mL，同時(shí)接種兩個(gè)平行管，混勻。將相同體積的目標菌菌懸液(與試管接種同一稀釋 度) 傾注平板(或適宜稀釋度0.1mL涂布平板) ，接種兩個(gè)平板，作接種量計數用 。30℃需氧培養24h。
5. 非目標菌的接種
接種1000CFU~5000 CFU的大腸埃希氏菌、糞腸球菌 ，接種體積不超過(guò)1mL，同時(shí)接種兩個(gè)平行管，混勻。同時(shí)將1mL菌懸液(比試管接種小10倍~100倍稀釋度)傾注平板(或適宜 稀釋度0.1mL 涂布平板)，接種兩個(gè)平板，作接種量計數用，30℃需氧培養24h。
6.培養液的接種
培養結束后，吸取10μL單核細胞增生李斯特氏菌培養液涂布至PALCAM瓊脂，每管一個(gè)平板，置于36℃需氧培養48h。
吸取10μL大腸埃希氏菌/糞腸球菌培養液分別涂布于TSA平板，每管一個(gè)平板，置于36℃需氧培養24h。
四、結果觀(guān)察與解釋
接種以下質(zhì)控菌株，30℃需氧培養24小時(shí)：
|
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
測試結果 |
質(zhì)控評價(jià)標準 |
|
單核細胞增生李斯特氏菌 |
ATCC 19115 |
10-100 |
在PALCAM平板上菌落數多不可計；菌落呈灰綠色，中心凹陷黑色，周?chē)泻谏?/span> |
在PALCAM上>10CFU 灰色至黑色菌落，帶有黑色暈環(huán) |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
1000-5000 |
在TSA平板上菌落數為0/0 |
在TSA上<100CFU |
|
糞腸球菌 |
ATCC 29212 |
1000-5000 |
在TSA平板上菌落數為0/0 |
在TSA上<100CFU |
圖1-1 李氏增菌肉湯LB1培養基微生物質(zhì)控結果
備注：a:單核細胞增生李斯特氏菌，b:大腸埃希氏菌，c:糞腸球菌
圖1-2 10μL單核細胞增生李斯特氏菌培養液涂布至PALCAM瓊脂
五、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分，需做其他補充試驗。
相關(guān)產(chǎn)品：
注：本文屬海博生物原創(chuàng )，未經(jīng)允許不得轉載。
