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一、產(chǎn)品用途及原理
用途：用于大腸埃希氏菌、O157菌、單增李斯特氏菌、腸桿菌科等的生化鑒定。
添加劑：每盒需配套1盒甲基紅試劑盒HB8280與1盒V-P試劑盒HB8281使用。
原理：䏡胨提供碳氮源、維生素和生長(cháng)因子；葡萄糖為可發(fā)酵的糖類(lèi)；磷酸氫二鉀是緩沖劑。
MR實(shí)驗中，不同細菌分解葡萄糖的產(chǎn)物不同，大腸埃希氏菌、單增李斯特氏菌可分解葡萄糖產(chǎn)生大量酸，使pH值下降到4.5以下，滴入甲基紅顯紅色，即為MR陽(yáng)性；產(chǎn)氣腸桿菌產(chǎn)酸較少，滴入甲基紅顯橙黃色。
V-P實(shí)驗中產(chǎn)氣腸桿菌、單增李特氏菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，并使丙酮酸脫羧，生成中性的乙酰甲基甲醇，在堿性溶液中被空氣氧化生成二乙酰，繼續與培養基中的胍基反應生成紅色化合物，即為V-P陽(yáng)性。
二、培養基配方（g/L）
|
䏡胨 |
7.0 |
|
葡萄糖 |
5.0 |
|
磷酸氫二鉀 |
5.0 |
|
pH值6.9±0.2（25℃） |
|
三、試驗方法
1、取適量培養物制備菌懸液，接種于MR-VP生化管中，36℃±1℃培養24h-48h。
2、甲基紅（MR）試驗
按照甲基紅試劑盒說(shuō)明書(shū)滴加甲基紅試劑，立即觀(guān)察結果。鮮紅色為陽(yáng)性，黃色為陰性。
3、V-P試驗
按照V-P試劑盒說(shuō)明書(shū)滴加V-P試劑，充分振搖生化管，觀(guān)察結果。陽(yáng)性反應立刻或于數分鐘內出現紅色，如為陰性，應放在36℃±1℃繼續培養4h再進(jìn)行觀(guān)察。
四、質(zhì)控結果
接種以下質(zhì)控菌株，放置于36℃±1℃需氧培養24h-48h。結果如圖1。
|
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量（CFU） |
方法 |
質(zhì)控結果 |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
>5000 |
定性 |
MR：+（變紅）；VP：- |
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單增李斯特氏菌 |
ATCC 19114 |
>5000 |
定性 |
MR：+（變紅）；VP：+（變紅） |
|
普通變形桿菌 |
ATCC 13355 |
>5000 |
定性 |
MR：+（變紅）；VP：- |
|
產(chǎn)氣腸桿菌 |
ATCC 13048 |
>5000 |
定性 |
MR：-；VP：+（變紅） |
|
大腸埃希氏菌O157 |
ATCC 35150 |
>5000 |
定性 |
MR：+（變紅）；VP：- |
培養24h：
培養32h：
培養40h：
培養44h：
培養48h：
培養52h：
圖1 MR-VP生化鑒定管微生物質(zhì)控結果
由圖1所示，接種質(zhì)控菌液后培養24h至52h的生化鑒定結果均相同。
相關(guān)產(chǎn)品：
注：本文屬海博生物原創(chuàng )，未經(jīng)允許不得轉載。
