本文挑選了部分客戶(hù)咨詢(xún)較多、反饋較多的問(wèn)題以問(wèn)答的形式進(jìn)行答疑。
常見(jiàn)問(wèn)題1
Q:我們配制培養基為什么會(huì )出現大量沉淀?
A:部分培養基含有較為豐富的無(wú)機鹽成分,在加熱和滅菌的過(guò)程中很容易發(fā)生反應形成沉淀。建議配制培養基時(shí)使用去離子水、蒸餾水、純化水,切勿使用普通自來(lái)水。但由于各單位使用的去離子水、蒸餾水、純化水實(shí)際含有離子程度并不相同(尤其是制水機自制水)在發(fā)生此種情況時(shí),可以嘗試使用市面上的高純度水(如屈臣氏、娃哈哈等品牌水)進(jìn)行溶解。
我們也發(fā)現部分客戶(hù)會(huì )自行調節pH或者添加額外的營(yíng)養成分,這些都可能導致培養基突然出現大量沉淀,往往是離子之間發(fā)生了復雜的化學(xué)反應。
另有部分培養基本身含有不溶于水的物質(zhì),如TTB含有大量碳酸鈣,其本身就不能夠完全溶解,此種情況為正,F象,將沉淀?yè)u勻后分裝使用即可。
常見(jiàn)問(wèn)題2
Q:我們購買(mǎi)的液體培養基,自己加了瓊脂之后滅菌完畢非常渾濁(生長(cháng)不佳),這是怎么回事?
A:雖然一般認為瓊脂不提供營(yíng)養成分,僅作為凝固劑幫助培養基成型。但在實(shí)際的生產(chǎn)過(guò)程中,由于工藝和來(lái)源等原因,瓊脂還是會(huì )含有部分糖或其他雜質(zhì),這些雜質(zhì)會(huì )一定程度上影響微生物的生長(cháng),影響實(shí)驗結果的判斷。部分含有雜質(zhì)較多的瓊脂,滅菌完畢后會(huì )與培養基中的離子反應,使得培養基渾濁,只要不是出現大量沉淀,一般不影響使用。部分客戶(hù)自購的瓊脂實(shí)際上凝膠強度較高,按照標準添加量,會(huì )使得凝固后的平皿凝膠強度過(guò)大,影響菌落的生長(cháng),這時(shí)候會(huì )造成菌落生長(cháng)較小,生長(cháng)較慢,回收率下降等負面影響,此時(shí)可略微降低瓊脂的添加量。
尤其部分植物組織培養的液體培養基,其含有極為豐富的無(wú)機鹽成分,添加瓊脂或其他營(yíng)養成分時(shí),應慎重考慮,最好先少量實(shí)驗,測試生長(cháng)效果。
常見(jiàn)問(wèn)題3
Q:為什么我們購買(mǎi)了你們的干粉培養基,滅菌完畢以后顏色偏深?
A:大多數培養基都含有豐富的營(yíng)養成分,如酵母浸粉,葡萄糖,乳糖等,這些糖類(lèi)、浸粉類(lèi)成分容易受熱焦化、酸化,絕大多數出現滅菌后顏色過(guò)深的情況都是因為滅菌時(shí)間過(guò)久、溫度過(guò)高,滅菌前沒(méi)有充分溶解導致的。建議客戶(hù)充分加熱溶解培養基后進(jìn)行分裝,滅菌前確保溶解后的產(chǎn)品沒(méi)有明顯的成團或成塊的粉末。其次應嚴格按照瓶身標簽的滅菌溫度和時(shí)間進(jìn)行滅菌,若更改滅菌時(shí)間和溫度,客戶(hù)應進(jìn)行工藝驗證。同時(shí)應注意滅菌完畢后及時(shí)將培養基從滅菌鍋內取出,請勿將培養基長(cháng)時(shí)間悶在滅菌鍋內。
注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。
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