培養基pH的檢測、調整與影響

  培養基的pH是影響培養基性能的重要指標之一，大多數培養基都是有固定的pH范圍，pH的偏離對培養基的指示能力、微生物的生長(cháng)狀況都有可能產(chǎn)生影響，因此在配制培養基時(shí)，pH的檢測、調整和控制也是非常關(guān)鍵的。

一、培養基pH的檢測

  早期的培養基標準由于不完善和存在爭議等問(wèn)題，甚至在不同的文獻或標準中有著(zhù)不同的范圍，隨著(zhù)現在標準制定越來(lái)越嚴格和完善，目前主流標準中都規定了培養基的pH應該以滅菌后25℃測定結果為準。

  1.液體培養基

液體培養基pH的測定比較簡(jiǎn)單，將培養基滅菌后冷卻至25℃時(shí)使用pH計測定即可。

  2.固體/半固體培養基

一些培養基因含有瓊脂，滅菌后冷卻至25℃時(shí)呈凝固狀態(tài)。對于此類(lèi)培養基的pH測定方法，目前標準中未規定的特別詳細�，F在市場(chǎng)上已經(jīng)有專(zhuān)門(mén)用來(lái)測定固體培養基pH專(zhuān)用的pH計探頭，若沒(méi)有的話(huà)，也可使用復合電極檢測（經(jīng)過(guò)實(shí)測，使用復合電極插入培養基中測定也能比較準確的反應培養基的pH）。

  注：（1）有些培養基滅菌后需額外補充其他成分，一般來(lái)說(shuō)應以完整培養基的pH測定結果為準。（2）不同的培養基pH受溫度影響會(huì )有變化，所以一定要在培養基25℃時(shí)進(jìn)行測定（不建議使用溫度補償功能，會(huì )有偏差）。（3）不需要知道培養基的準確pH時(shí)，使用pH試紙可以觀(guān)察培養基大致的pH值。但要注意，有些培養基因本身帶有顏色或者含有酸堿指示劑，不適合用pH試紙檢測，不同的顏色相互混合會(huì )出現其他顏色反應。

二、培養基pH的調整

  現在市場(chǎng)上賣(mài)的商品化培養基大多數已經(jīng)調整好了培養基，無(wú)需另外調整。但有時(shí)候受滅菌工藝（如不同的滅菌鍋整個(gè)加熱時(shí)長(cháng)會(huì )有差別，導致滅菌后pH可能偏離，或者更換滅菌方式也會(huì )導致pH不在范圍內）或特殊用途等因素需要進(jìn)行培養基pH的調整，一般可使用1mol/L的鹽酸或氫氧化鈉調整（也可使用蘋(píng)果酸、酒石酸、碳酸鈉等進(jìn)行調整），一般要在滅菌前完成調整。若要在滅菌后進(jìn)行調整則比較困難，需要使用無(wú)菌的酸溶液或堿溶液進(jìn)行調整。

三、培養基pH對使用效果的影響

  大多數培養基都是有0.2-0.4的波動(dòng)范圍（如TSB要求pH值為7.3±0.2），對于沒(méi)有規定范圍的培養基，一般控制在±0.2范圍內即可。不同的培養基若pH出現偏離，也會(huì )有不同的影響。

  對于大多數的培養基來(lái)說(shuō)，pH的少量偏離通常不會(huì )造成顯著(zhù)的不良影響。如TSB要求pH在7.3±0.2，實(shí)際上pH即使下降0.1-0.2對使用結果也無(wú)顯著(zhù)影響，這是因為多數微生物的生長(cháng)范圍是比較寬泛的，并不是一定要在7.1-7.5之間才能生長(cháng)。但要注意，有些培養基的pH不能偏離過(guò)大，特別是以酸堿度進(jìn)行篩選的培養基或者含有酸堿指示劑的培養基，如TCBS瓊脂要求pH為8.4-8.8，屬于偏堿性的環(huán)境，弧菌可以在此培養基上生長(cháng)，而不耐堿性環(huán)境的雜菌則不生長(cháng)或生長(cháng)差，若pH偏低則可能導致一些雜菌過(guò)多生長(cháng)，若pH偏高則可能導致弧菌生長(cháng)不良。此外培養基中含有酸堿指示劑，若培養基的pH不正確，配制出的培養基顏色也會(huì )不正確，最終細菌生長(cháng)后培養基的顏色變化也可能會(huì )出現偏差，導致無(wú)法準確判斷結果。

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