一、實(shí)驗與水質(zhì)
實(shí)驗是指對現象所做出的假設推測加以驗證的動(dòng)作。假設能否被證明為真理,與假設能否具有再現性的結果至關(guān)重要。實(shí)驗的再現性除了要有良好的技巧,還受到所用化學(xué)試劑的純度和分析儀器的精密度的影響。實(shí)驗中用來(lái)配制溶液的化學(xué)試劑及所使用的水的純度也非常重要。假設水中污染物對實(shí)驗檢測會(huì )造成影響,就必須去除這些物質(zhì)。此外,為了取得良好的再現性結果,有必要使用能保持穩定水質(zhì)的純水。
二、實(shí)驗用水的制備和分級
實(shí)驗用水是指由普通水經(jīng)蒸餾、反滲透、電滲析、微孔過(guò)濾、去離子等方法制備得到,在實(shí)驗室用于試劑配制、樣品浸提、器皿洗滌、分析測試和生物培養等操作的水。
實(shí)驗室水的用途多種多樣,除了一般的清潔用水外,分析研究、計量檢測等實(shí)驗中對水的質(zhì)量具有非常嚴格的要求,國際標準化組織和國內都制定了實(shí)驗室用純水的質(zhì)量標準。
實(shí)驗用水分為三個(gè)等級:一級水、二級水和三級水。
一級水用于有嚴格要求的分析試驗,包括對顆粒有要求的試驗。如高效液相色譜分析用水。一級水可用二級水經(jīng)過(guò)石英設備蒸餾或離子交換混合床處理后,再經(jīng)0.2μm微孔濾膜過(guò)濾來(lái)制取。
二級水用于無(wú)機痕量分析等試驗,如原子吸收光譜分析用水。二級水可用多次蒸餾或離子交換等方法制取。
三級水用于一般化學(xué)分析試驗。三級水可用蒸餾或離子交換等方法制取。
本文著(zhù)重介紹配制培養基對水質(zhì)的要求。
三、培養基配制用水
《GB4789.28-2024食品安全國家標準食品微生物學(xué)檢驗培養基和試劑的質(zhì)量要求》中,對實(shí)驗用水做了明確說(shuō)明:實(shí)驗用水的電導率在25℃時(shí)不應超過(guò)25μS/cm(相當于電阻率≥0.04 MΩ/cm),除非另有規定要求。試驗用水的微生物污染不應超過(guò)103CFU/mL,應按GB 4789.2定期檢驗微生物污染水平。相關(guān)標準可查閱:。
該標準中對于培養基配制過(guò)程中出現的質(zhì)量問(wèn)題和可能的原因分別做了系統歸納(圖1)。
圖1培養基配制時(shí)出現的異,F象及常見(jiàn)原因分析
從表中可以清晰看到,水質(zhì)不佳,會(huì )導致培養基pH不正確、顏色異常、產(chǎn)生沉淀,甚至會(huì )進(jìn)一步影響微生物的生長(cháng)。所以,在配制培養基時(shí),一定要保證配制用水的質(zhì)量。通常用蒸餾水、去離子水即可,不能使用礦泉水,更不能使用自來(lái)水,使用不同水質(zhì)配制的培養基情況如圖2.
實(shí)驗室自制純化水 品牌純凈水 飲用礦泉水 自來(lái)水
圖2-1高壓滅菌前的培養基狀態(tài)
實(shí)驗室自制純化水 品牌純凈水 飲用礦泉水 自來(lái)水
實(shí)驗室自制純化水 品牌純凈水 飲用礦泉水
圖2-2 高壓滅菌后的培養基狀態(tài)
圖2 分別用不同水質(zhì)配制培養基,滅菌前后的狀態(tài)差異
從圖中可以清晰地看到,使用自來(lái)水配制的培養基,不如用其它水質(zhì)配制的培養基澄清透明(圖2-1),滅菌后非常渾濁導致培養基不能使用,礦泉水配制的培養基沉淀物業(yè)比較多(圖2-2),并且水中本來(lái)含有的一些離子也會(huì )對培養基的性能產(chǎn)生影響。
在實(shí)驗過(guò)程中,如果出現配制的培養基不澄清、有沉淀的現象,要首先確認實(shí)驗室用水是否合格,然后再進(jìn)一步查找其它原因。
四、注意事項
如果是實(shí)驗室自己制備純化水等,則應加強對純水的各個(gè)生產(chǎn)工藝程序的科學(xué)管理,重視對各工序工作人員的技術(shù)培訓,嚴格按操作規程生產(chǎn),維護生產(chǎn)儀器正常、安全、無(wú)污染,有利于產(chǎn)出水的水質(zhì)穩定性。
相關(guān)標準:
《GB4789.28-2024食品安全國家標準食品微生物學(xué)檢驗培養基和試劑的質(zhì)量要求》 點(diǎn)擊查看
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