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一、用途
用于濾膜法測定生活飲用水及其水源水中的總大腸菌群。
二、培養基配方（g/L）：
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蛋白胨 |
10.0 |
|
磷酸二氫鉀 |
2.5 |
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乳糖 |
10.0 |
|
無(wú)水亞硫酸鈉 |
3.3 |
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堿性品紅 |
0.3 |
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瓊脂 |
12.5 |
|
pH7.4±0.2 25℃ |
|
此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養成分以獲得最佳的結果。
三、試驗原理:
蛋白胨提供氮源、維生素、氨基酸和碳源；磷酸二氫鉀是緩沖劑；乳糖是大腸菌群可發(fā)酵的糖類(lèi)；堿性品紅為指示劑，具有醌式結構，呈深紅色，亞硫酸鈉能將堿性品紅還原，使其褪色，所以制成的培養基呈淡粉紅色；發(fā)酵乳糖的細菌產(chǎn)生乙醛，與亞硫酸鈉結合，可恢復堿性品紅的醌式結構，所以菌落呈深紅色；沙門(mén)氏和志賀氏菌屬細菌不發(fā)酵乳糖，故菌落與培養基同為淡紅色或無(wú)色；瓊脂是培養基的凝固劑。
四、試驗方法：
1. 稱(chēng)取本品39.0g，加入20ml無(wú)水乙醇和980ml蒸餾水中加熱攪拌溶解，分裝，121℃高壓滅菌15分鐘，備用。
2. 制備質(zhì)控菌液，選擇合適稀釋度的目標菌質(zhì)控菌液0.1ml，均勻涂布于待測平板以及參比平板上，每一稀釋度接種兩個(gè)平板。
3. 用1μL接種環(huán)取非目標菌質(zhì)控菌液1環(huán)，將接種環(huán)接觸容器邊緣3次去除多余液體，在平板表面劃六條平行直線(xiàn)，同時(shí)接種兩個(gè)平板。
4. 36±1℃倒置培養基培養24±2小時(shí)，記錄實(shí)驗結果。
五、試驗結果：
接種以下質(zhì)控菌株，36±1℃需氧培養22-26小時(shí)：
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質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數 培養基 |
方法 |
質(zhì)控評定標準 |
其他特征 |
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金黃色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
紫紅色菌落，有金屬光澤 |
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產(chǎn)氣腸桿菌 |
CMCC(B)45103 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
紫紅色菌落 |
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陰溝腸桿菌 |
ATCC23355 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
紫紅色菌落，有金屬光澤 |
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弗氏檸檬酸桿菌 |
ATCC43864 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
紫紅色菌落，有金屬光澤 |
|
傷寒沙門(mén)氏菌 |
ATCC14028 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
無(wú)色菌落 |
圖1 Endo培養基微生物質(zhì)控結果
備注：a：陰溝腸桿菌，b:弗氏檸檬酸桿菌，c:產(chǎn)氣腸桿菌，d:大腸埃希氏菌，e：沙門(mén)氏菌，f:金黃色葡萄球菌
六、方法的局限性：
本培養基僅為細菌鑒定的一部分，需做其他補充試驗。
相關(guān)產(chǎn)品：
注：本文屬海博生物原創(chuàng )，未經(jīng)允許不得轉載。
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