目的基因的高效表達

通過(guò)基因操作及篩選獲得重組子后，最重要的問(wèn)題就是目的基因的表達效率。提高表達效率是一個(gè)多學(xué)科交叉的問(wèn)題，應該在基因體外重組的初期就考慮基因表達效率的問(wèn)題，然后通過(guò)工程實(shí)踐進(jìn)行優(yōu)化，并將工程中發(fā)現的問(wèn)題不斷進(jìn)行改進(jìn)。需要通過(guò)生物科學(xué)家和工程科學(xué)家的共同努力。

在基因重組的前期工作中，影響目的基因表達的主要因素是：宿主細胞選擇、基因密碼子優(yōu)化、質(zhì)�；蚱渌�載體的選擇及設計、抗性標記設計、誘導劑或誘導方法選擇及設計、產(chǎn)物表達方式設計等。這些問(wèn)題已經(jīng)在前面幾節中進(jìn)行了討論，如果要了解更詳細的細節，可以參考有關(guān)專(zhuān)著(zhù)和研究論文。值得指出的是：這些問(wèn)題雖然已經(jīng)有了必要的理論指導，但仍無(wú)法保證就能夠獲得高效表達，而且經(jīng)驗往往占有很重要的地位。

從工程角度考慮，要獲得高效表達應該做好如下工作：宿主細胞培養基設計和培養條件優(yōu)化、提高培養過(guò)程中的質(zhì)粒穩定性問(wèn)題、降低底物和/或產(chǎn)物（副產(chǎn)物）抑制的策略等。本節將針對基因重組微生物培養及目標產(chǎn)物表達進(jìn)行討論。

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