一、試驗原理:
克羅諾顯色培養基是青島海博生物公司根據GB4789.40-2024生產(chǎn)的培養基,用于嬰幼兒配方食品、嬰幼兒輔助食品、乳及乳制品及其原料中克羅諾桿菌的檢驗?肆_諾桿菌顯藍—綠色菌落,其它菌顯無(wú)色或黃色。
胰蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、維生素、生長(cháng)因子;氯化鈉維持滲透壓;瓊脂為凝固劑;脫氧膽酸鈉主要抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(cháng),檸檬酸鐵銨和硫代硫酸鈉可使產(chǎn)硫化氫的非目標菌呈現黑色,阪崎克羅諾桿菌可特異性分解底物5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃葡糖甙使菌落顯藍-綠色,其他不產(chǎn)硫化氫、不分解底物的菌一般顯無(wú)色或黃色。
二、培養基配方(g/L):
胰蛋白胨 |
7.0 |
酵母浸粉 |
3.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
檸檬酸鐵銨 |
1.0 |
硫代硫酸鈉 |
1.0 |
脫氧膽酸鈉 |
0.25 |
5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃葡糖甙 |
0.15 |
瓊脂 |
15.0 |
pH 7.3±0.2 25℃ |
三、試驗方法:
粉體裝培養基的使用:
1. 稱(chēng)取本品6.48g加入200ml蒸餾水,加熱煮沸完全溶解,121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻至50℃左右時(shí),傾入無(wú)菌平皿。
2. 輕輕混勻mLST-Vm肉湯培養物,用10ul接種環(huán)挑取1環(huán)增菌液劃線(xiàn)接種于克羅諾桿菌顯色培養基平板,接種2個(gè)平板。
3. 倒置放入培養箱36℃±1℃培養24h±2h,典型的克羅諾桿菌為藍 - 綠色菌落。
4. 挑取可疑菌落劃線(xiàn)接種于TSA平板36℃±1℃培養24h±2h,做PCR鑒定或生化鑒定。
四、結果觀(guān)察與解釋
接種以下質(zhì)控菌株,36℃±1℃培養24h±2h:
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
質(zhì)控評定標準 |
其他特征 |
阪崎克羅諾桿菌 |
ATCC 29544 |
50-250 |
PR≥0.5 |
藍綠色菌落 |
鼠傷寒沙門(mén)氏菌 |
ATCC 14028 |
/ |
/ |
無(wú)色,有黑色中心 |
普通變形桿菌 |
CMCC(B) 49027 |
/ |
/ |
灰色至黑色菌落 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
/ |
G≤1 |
/ |
糞腸球菌 |
ATCC 29212 |
/ |
G≤1 |
/ |
圖1-2 克羅諾顯色培養基微生物質(zhì)控結果
備注:a:阪崎克羅諾桿菌 b:鼠傷寒沙門(mén)氏菌 c:普通變形桿菌d:金黃色葡萄球菌e:糞腸球菌
五、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
相關(guān)產(chǎn)品:
注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。