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一、版本概況
GB4789.4食品中沙門(mén)氏菌檢驗標準從1994版到即將實(shí)施的2024版，總共經(jīng)歷了6個(gè)版本的更新。與2016版本相比，2024版本主要在一些操作細節、使用培養基的調整及鑒定方法做了變更，預計將在2024年8月份正式實(shí)施。
二、變更內容
1.樣品預增菌改動(dòng)
（1）增加乳粉檢驗前處理的說(shuō)明，25g乳粉加入至225mL BPW液體表面，暫不調整pH也不混勻，室溫靜置60±5min后再混勻，36℃培養16-18h。此操作是經(jīng)過(guò)實(shí)驗室驗證，有助于受損沙門(mén)細菌的恢復，減少對沙門(mén)氏菌的損傷，提高檢出率。
（2）冷凍產(chǎn)品的解凍溫度由45℃以下更改為40-45℃，2-5℃更改為2-8℃，主要是更加貼合冰箱的冷藏溫度。
2.選擇性增菌步驟改動(dòng)
（1）RVS替代原來(lái)的SC培養基，一方面是因為SC培養基里面的亞硒酸氫鈉有劇毒，對人體健康和環(huán)境危害比較大，且儲存不穩定易分解，另一方面受社會(huì )現狀的影響，目前疾控監測傷寒沙門(mén)氏菌導致的發(fā)病率并不高，適合傷寒沙門(mén)氏菌生長(cháng)的SC相對來(lái)講適用性不是很強了，更換為RVS培養箱相應也可以提高檢出率（RVS具有更強的選擇性，抑制雜菌的效果要強于SC）。同時(shí)培養溫度變?yōu)?2℃，接種體積變?yōu)?.1mL。
（2）TTB培養溫度增加了可選擇36±1℃進(jìn)行培養，主要是考慮到了樣品背景菌的影響。對于進(jìn)行一定加工過(guò)的樣品，通常背景菌含量較少，干擾性不強，在36±1℃培養即可。而對于背景菌含量相對較高的樣品（如生鮮禽肉等），雜菌的干擾性相對較大，提高至42℃培養可以在一定程度上減少雜菌的繁殖，提高檢出率。
（3）增加了預增菌液（BPW）允許在2-8℃冷藏保存不超過(guò)72h再進(jìn)行選擇性增菌，通過(guò)驗證，此操作對最終檢出率沒(méi)有顯著(zhù)影響，也是考慮到企業(yè)現狀，如果遇到休班或者其他原因不能當天及時(shí)檢驗等情況，可以暫存在2-8℃冰箱內冷藏待檢。
3.分離步驟改動(dòng)
增加了選擇性增菌液（TTB和RVS）允許在2-8℃冷藏保存不超過(guò)72h，再轉接選擇性平板進(jìn)行分離培養，原因同上。
4.生化鑒定步驟改動(dòng)
（1）挑取菌落數由原來(lái)的選擇性平板分別挑取2個(gè)菌落更改為總共挑取4個(gè)以上的典型菌落，且宜選擇來(lái)自不同增菌液和不同選擇性平板上的菌落，同時(shí)也允許先對一個(gè)可疑或典型菌落進(jìn)行鑒定，若不是沙門(mén)再對其他可疑菌落進(jìn)行鑒定。新標準的方法更具有靈活性，可疑根據實(shí)際的檢驗結果來(lái)進(jìn)行選擇鑒定，同時(shí)也能減少工作量，降低檢驗成本，節約試劑。
（2）生化鑒定出現A1反應時(shí)，增加血清學(xué)鑒定后報告結果，出現A3反應補做ONPG后，也要加血清學(xué)鑒定后報告結果。表5的生化群和生化反應進(jìn)行了擴充，新標準列出7個(gè)亞種，相比較于原標準，增加了明膠酶、酒石酸鹽、半乳糖醛酸、γ-谷胺酰轉肽酶，β-葡糖醛酸苷酶、黏液酸、乳糖、O1噬菌體裂解試驗。在進(jìn)行判定上與原標準基本上沒(méi)有改動(dòng)，只是增加了項目。
5.血清鑒定：主要在H抗原鑒定上，詳細寫(xiě)出了簡(jiǎn)易平板法、小玻管法和小套管法操作方法。
6.培養基配方改動(dòng)
（1）TTB：成分沒(méi)有改變，但基礎液體積由原來(lái)的1050mL更改為1000mL，滅菌溫度由121℃20min更改為加熱煮沸滅菌，pH由7.0±0.2更改為7.6±0.2。名稱(chēng)2024版存在一點(diǎn)問(wèn)題，前后不一致，前半部分內容使用的名稱(chēng)為“四硫磺酸鈉煌綠增菌液”，附錄名稱(chēng)為“四硫磺酸鹽煌綠增菌液”。
（2）新增RVS配方，刪除SC。
（3）HE、BS、XLD、TSI等培養基一些成分名稱(chēng)做了規范化更改（如牛肉膏改為了牛肉浸粉，酵母膏改為了酵母浸粉），傾注平板的溫度都由50-55℃調整為48±2℃，個(gè)別培養基的瓊脂量做了固定，總體變化不大，對培養基使用和效果沒(méi)有影響。
（4）蛋白胨水配方中補加了色氨酸，蛋白胨用量減少至10g，主要是增加的色氨酸可以生成更多的吲哚，有利于陽(yáng)性結果的觀(guān)察。
（5）氰化鉀試驗要求在試驗管覆蓋石蠟，目的是阻止氰化鉀揮發(fā)失效導致出現假陽(yáng)性結果。
注：本文屬海博生物原創(chuàng )，未經(jīng)允許不得轉載。
