同步分培養就是通過(guò)一定的手段,使培養物中所有的細胞處于同一生長(cháng)階段,使群體與個(gè)體的行為保持一致。主要用在實(shí)驗室中進(jìn)行微生物細胞的生理生化研究。
同步分裂培養的方法主要有兩種:
誘導法和選擇法。
(1)誘導法
控制培養的物化條件(如溫度、營(yíng)養物),誘使細胞同步生長(cháng)的方法。
如果讓菌體在低于或高于最適生長(cháng)溫度的環(huán)境下培養段時(shí)間,這些細胞緩慢生長(cháng),但不發(fā)生分裂,然后,再將培養溫度恢復到最適生長(cháng)溫度,這大多數細胞就會(huì )同時(shí)進(jìn)行分裂。
通過(guò)改變培養基成分來(lái)獲得同步培養物。例如限制碳源或其他營(yíng)養物,使細胞只能進(jìn)行一次分裂而不能繼續生長(cháng),從而獲得剛分裂的細胞群體,然后轉入適宜的培養基中,它們便進(jìn)入同步生長(cháng)。對于營(yíng)養缺陷型菌株,可以通過(guò)控制它們所缺乏的某種營(yíng)養物質(zhì)而達到同步化。
(2)選擇法
通過(guò)差速離心或過(guò)濾等手段,將處于不同生長(cháng)階段的細胞分開(kāi),從而實(shí)現同步培養。
選擇法適用于不同生長(cháng)階段的細胞大小和比重有明顯差異的微生物種類(lèi)。不會(huì )影響菌體的正常代謝,獲得的菌體活力正常。硝酸纖維素薄膜法是一種較為巧妙的操作方法。
需要注意的是,細胞個(gè)體之間差異總是存在的,這些差異隨著(zhù)分裂次數的增加就會(huì )逐漸增大,所以無(wú)論是誘導法還是選擇法,獲得的培養物最多只能同步分裂4~5代,有的僅能維持一代。
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