鑒定類(lèi)培養基的檢驗方法

一、菌株制備

  活化：將所需的質(zhì)控菌株接種至非選擇性平板上培養至菌落適宜大小。

  注：對于一般生長(cháng)速度較快的菌株，過(guò)夜培養即可；生長(cháng)速度慢的菌株可適當延長(cháng)培養時(shí)間。

  菌懸液制備（接種液體培養基使用）：挑取平板上的純菌落至生理鹽水中，制成約5麥氏濁度的菌懸液（約10⁹CFU/mL）。

  注：此處不建議使用肉湯培養物制備菌懸液，肉湯培養基中含有的成分可能會(huì )對部分試驗結果造成影響，因此宜采用平板上的菌落制備菌懸液。

二、接種方法及注意事項說(shuō)明

  1.液體類(lèi)鑒定培養基：吸取50-100μL制備好的菌懸液加入制備好的培養基中，置于標準規定的條件下進(jìn)行培養。也可用接種針或接種環(huán)挑取待測菌落，直接接種至培養基中。

  注：一般情況下，接種的菌懸液濃度越大，可以更早的觀(guān)察到試驗結果；但對于需觀(guān)察是否渾濁的生化試驗，接種的菌懸液濃度和體積不宜過(guò)大。

  2.半固體/固體擺直立類(lèi)培養基：用接種針挑取平板上的菌落，垂直穿刺接種。

  3.平板點(diǎn)種：用接種環(huán)或接種針挑取平板上的菌落，點(diǎn)種于平板上，接種不宜太過(guò)密集。

  4.平板劃線(xiàn)：用接種環(huán)挑取菌落或菌懸液，在平板上分區劃線(xiàn)。

  5.長(cháng)斜面：用接種環(huán)或接種針挑取菌落在斜面上“之”字形劃線(xiàn)。

  6.高層斜面：用接種針挑取菌落，在斜面上“之”字形劃線(xiàn)，并穿刺底層。

三、結果觀(guān)察

  接種對應的陰陽(yáng)性菌株，應出現對應的陽(yáng)性或陰性反應，或特定的現象，即為培養基合格。

  注：需添加試劑觀(guān)察現象的，應嚴格按照說(shuō)明書(shū)操作。

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