異菌脲檢測方法

1．分析目標化合物
異菌脲、N－(3，5－二氯苯)－3－異丙基－2，4－二氧代咪唑烷基－1－碳酰胺
2．儀器設備
帶紫外分光光度檢測器的高效液相色譜儀。
3．試劑
使用附錄2所列試劑。
4．標準品
異菌脲：含異菌脲99％以上，熔點(diǎn)為135℃。
N－(3，5－二氯苯)－3－異丙基－2，4－二氧代咪唑烷基－1－碳酰胺：含N－(3，5－二氯苯)－3－異丙基－2，4－二氧代咪唑烷基－1－碳酰胺99％以上，熔點(diǎn)為200℃。
5．試驗溶液的制備
a 提取方法
① 谷類(lèi)、豆類(lèi)及種籽類(lèi)
將樣品粉碎，通過(guò)420μm標準網(wǎng)篩后，稱(chēng)取其20.0g。
加入100mL乙腈，放置1小時(shí)后，攪拌3分鐘，用涂布1cm厚硅藻土的濾紙抽濾，濾液移入500mL的分液漏斗(Ⅰ)中。收集濾紙上的殘留物，加入100mL乙腈，攪拌3分鐘，用涂布1cm厚硅藻土的濾紙抽濾，合并濾液于分液漏斗(Ⅰ)中。加入50mL乙腈飽和正己烷，用振蕩器激烈振蕩5分鐘后，靜置，收集乙腈層于磨口減壓濃縮器中，40℃以下濃縮至約30mL。
將其移入預先注入100mL 10％氯化鈉溶液和100mL乙酸乙酯的500mL分液漏斗（Ⅱ）中，用振蕩器激烈振蕩5分鐘后，靜置，乙酸乙酯層移入500mL分液漏斗(Ⅲ)。水層中加入100mL乙酸乙酯，按上述同樣方法操作，合并乙酸乙酯層于分液漏斗(Ⅲ)中。加入50mL 10％氯化鈉溶液，用振蕩器激烈振蕩5分鐘后，靜置，乙酸乙酯層移入500mL三角瓶中。加入適量無(wú)水硫酸鈉，不時(shí)振蕩、混合，放置15分鐘后，濾入磨口減壓濃縮器中。再加入50mL乙酸乙酯洗滌上述三角瓶，以此洗滌液洗滌濾紙上的殘渣，重復操作二次，合并兩洗滌液于磨口減壓濃縮器中，40℃以下除去乙酸乙酯，殘留物中加入5mL正己烷溶解。
② 水果、蔬菜和末茶
水果和蔬菜：準確稱(chēng)取約1kg樣品，必要時(shí)定量加入適量的水，攪碎混合均勻后，稱(chēng)取相當于20.0g樣品的量。
末茶：稱(chēng)取10.0g樣品。
加入100mL丙酮，攪拌3分鐘后，用涂布1cm厚硅藻土的濾紙，抽濾于磨口減壓濃縮器中。取出濾紙上的殘留物，加入100mL丙酮，攪拌3分鐘后，按上述同樣操作，合并濾液于磨口減壓濃縮器中，40℃以下濃縮至約50mL。
加入5mol/L的氫氧化鈉溶液，調整pH6～7，移入預先注入100mL 10％氯化鈉溶液和100mL乙酸乙酯的500mL分液漏斗(Ⅰ)中。用振蕩器激烈振蕩5分鐘后，靜置，乙酸乙酯層移入500mL分液漏斗（Ⅱ）中。水層中加入100mL乙酸乙酯，按上述同樣方法操作，合并乙酸乙酯層于分液漏斗（Ⅱ）中。加入50mL 10％氯化鈉溶液，用振蕩器激烈振蕩5分鐘后，靜置，乙酸乙酯層移入500mL三角瓶中，加入適量無(wú)水硫酸鈉，不時(shí)振搖、混合，放置15分鐘后，濾入磨口減壓濃縮器中。再加入50mL乙酸乙酯洗滌三角瓶，以此洗滌液洗滌濾紙上的殘留物，重復操作二次，合并兩洗滌液于減壓濃縮器中，40℃以下除去乙酸乙酯，殘留物中加入5mL正己烷溶解。
③末茶以外的茶
將10.0g樣品浸泡在600mL 100℃水中，室溫下放置5分鐘后，過(guò)濾，移取300mL冷卻后的濾液于500mL三角瓶(I)中。加入100mL丙酮和2mL飽和乙酸鉛溶液，輕輕振蕩15分鐘后，用涂布1cm厚硅藻土的濾紙抽濾于1000mL分液漏斗中。再加入50mL丙酮：水（1∶1）混合液洗滌三角瓶(Ⅰ)，以此洗滌液洗滌濾紙上的殘留物，合并洗滌液于上述分液漏斗中。加入20g氯化鈉和100mL正己烷，用振蕩器激烈振蕩5分鐘后，靜置，正己烷層移入500mL分液漏斗。水層中加入100mL正己烷，按上述同樣方法操作，合并正己烷層于上述分液漏斗中。
加入50mL 10％氯化鈉溶液，用振蕩器激烈振蕩5分鐘后，靜置，正己烷層移入500mL三角瓶中（II）中。加入適量無(wú)水硫酸鈉，不時(shí)振蕩、混合，放置15分鐘后，濾入磨口減壓濃縮器中。再加入50mL正己烷洗滌三角瓶（II），以此洗滌液洗滌濾紙上的殘留物，重復操作二次，合并兩洗滌液于減壓濃縮器中，40℃以下除去正己烷，殘留物中加入5mL正己烷溶解。
b 凈化方法
在內徑20mm，長(cháng)300mm的色譜管中注入10g懸浮在正己烷中的柱色譜用合成硅酸鎂，其上面再裝入約8g無(wú)水硫酸鈉,放出正己烷至柱上端留有少量正己烷。柱中注入a 提取方法所得的溶液后，注入100mL乙醚：正己烷（1∶1）混合溶液,棄去流出液。再注入100mL丙酮：正己烷（3∶17）混合溶液,收集流出液于磨口減壓濃縮器中，40℃以下除去正己烷，殘留物中加入乙腈溶解，準確至5mL，此為試驗溶液。
6．操作方法
a 定性試驗
按下列操作條件進(jìn)行試驗，試驗結果必須與標準品的一致。
操作條件
柱填充劑：十八烷基甲硅烷基化硅膠(粒度5μm)。
柱：內徑4.5mm，長(cháng)150mm不銹鋼管。
柱溫： 25℃
檢測器：波長(cháng)230nm。
流動(dòng)相：乙腈：水(3：2)混合溶液。調整流速使異菌脲約9分鐘流出。
b 定量試驗
根據與a 定性試驗同樣操作條件所得試驗結果，用峰高法或峰面積法分別對異菌脲和N－(3，5－二氯苯)－3－異丙基－2，4－二氧代咪唑烷基－1－碳酰胺進(jìn)行定量，由異菌脲和N－(3，5－二氯苯)－3－異丙基－2，4－二氧代咪唑烷基－1－碳酰胺的和求得異菌脲的含量。
7．定量限
0.05 mg/kg
8．注意事項
對異菌脲及其代謝物N－(3，5－二氯苯)－3－異丙基－2，4－二氧代咪唑烷基－1－碳酰胺分別進(jìn)行定量，它們的和為異菌脲分析值。
   
   

 

上一篇：乙氧喹啉檢測方法

下一篇：異柳磷檢測方法