淺談微生物檢驗中的假陽(yáng)性與假陰性（一）

  沒(méi)有一種培養基能夠一步便100%確定樣品中是否含有某種細菌，檢驗樣品中是否含有某種細菌，往往需要多步生化反應判斷或輔以血清學(xué)或PCR檢測。如何在檢驗中抑制干擾菌同時(shí)找出我們需要的目標菌，盡量避免出現假陰性（實(shí)際樣本含目標菌，但未檢出，此時(shí)為假陰性）或假陽(yáng)性（實(shí)際樣本不含目標菌，但檢出，此時(shí)為假陽(yáng)性）一直是微生物檢驗工作中的重點(diǎn)和難點(diǎn)。本系列旨在以GB.4789系列為基礎，淺談可能出現的假陰性與假陽(yáng)性情況。

  檢驗沙門(mén)氏菌屬時(shí)，由于其種類(lèi)繁多，生化反應各異，且在生活中十分常見(jiàn)、送檢樣本多，非常容易在檢驗過(guò)程中出現假陽(yáng)性和假陰性的情況。
  在《GB 4789.4-2016 食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 沙門(mén)氏菌檢驗》（下文稱(chēng)《標準》）中，第一布首先需要進(jìn)行預增菌，這是為了避免樣品中的沙門(mén)氏菌受損活力不佳導致選擇性增菌后無(wú)沙門(mén)氏菌檢出，導致假陰性。第二步選擇性增菌時(shí)，則同時(shí)選取了亞硒酸鹽胱氨酸增菌液（SC）和四硫磺酸鹽煌綠增菌液（TTB）兩種選擇性增菌培養基來(lái)對沙門(mén)氏菌進(jìn)行增菌，這是因為SC與TTB各自的抑菌性不同，對不同種類(lèi)沙門(mén)氏菌的增菌效果也不同。SC的抑菌性相對較弱，TTB抑菌性相對較強。避免選取單一增菌液造成后續結果出現假陰性。

  而在接下來(lái)的菌種分離挑選可疑菌落的過(guò)程中，則必選亞硫酸鉍（BS）瓊脂，沙門(mén)氏菌顯色、HE瓊脂、XLD瓊脂三選一，這也是因為不同培養基，對于不同沙門(mén)氏菌的選擇性并不完全相同，這樣選擇可以盡可能提高檢出率避免假陰性。

  在此步驟經(jīng)常有人會(huì )產(chǎn)生疑問(wèn)，為什么HE、XLD、BS上幾乎所有形態(tài)的菌落都被納入了可疑菌落，為什么顯色平皿上已經(jīng)顯色卻不能直接判定有沙門(mén)氏菌？其實(shí)，沙門(mén)氏菌種類(lèi)繁多，常見(jiàn)的沙門(mén)氏菌多數為硫化氫反應陽(yáng)性，在HE\XLD\BS上呈現出黑色中心菌落，但也應注意到，部分沙門(mén)氏菌，如甲型副傷寒沙門(mén)氏菌，硫化氫反應陰性或硫化氫產(chǎn)生較少，此時(shí)他們會(huì )呈現出無(wú)色菌落。部分沙門(mén)氏菌，如亞利桑那沙門(mén)氏菌，也可發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸，呈現周?chē)�黃色的菌落而部分變形桿菌屬細菌，也會(huì )產(chǎn)生硫化氫，導致菌落產(chǎn)生黑色中心。而《標準》中對于可疑目標菌落的樣式，也有詳細的說(shuō)明。而沙門(mén)顯色培養基，雖然對沙門(mén)氏菌具有高度的特異性，但是一些非沙門(mén)氏菌屬的細菌，也會(huì )呈現紫色（此處紫色為沙門(mén)氏菌顯色培養基第二代上沙門(mén)氏菌呈現的典型顏色），造成假陽(yáng)性，因此不能僅憑沙門(mén)氏菌顯色平皿的顏色反應就直接判定是否含有沙門(mén)氏菌，必須進(jìn)行下一步的生化鑒定，必要時(shí)進(jìn)行血清學(xué)分型。

  由此我們可以發(fā)現，在《標準》中，都是為了盡可能的檢出沙門(mén)氏菌，避免假陰性，而選用了多種培養基同時(shí)進(jìn)行實(shí)驗，在檢驗中是不可以只做某一種或只做某一步的，否則會(huì )極大增加假陰性出現的概率。

相關(guān)產(chǎn)品：

亞硒酸鹽胱氨酸增菌液（SC）-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情

四硫磺酸鹽煌綠增菌液基礎(TTB)-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情

相關(guān)標準：

GB 4789.4-2016 沙門(mén)氏菌檢驗 -點(diǎn)擊下載標準

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