GB 4789.35乳酸菌檢驗新舊標準變化比較詳解

一、簡(jiǎn)要說(shuō)明

  GB 4789.35-2023于2023年9月6日發(fā)布，將于2024年3月6日實(shí)施。新標準中不但對正文內容做了一些變動(dòng)：

  增加了實(shí)時(shí)熒光PCR方法為選做方法；

  修改了乳酸菌的定義、樣品制備和培養時(shí)間；

  修改了嗜熱鏈球菌和乳桿菌計數方法的描述；

  修改了部分培養基成分、儲備液濃度和制備方法。

  同時(shí)對兩個(gè)重要的培養基（MRS和MC）成分和名稱(chēng)也做了改動(dòng)，引入了三個(gè)新產(chǎn)品（稀釋液、DNA提取液、10×PCR緩沖液），另外對兩款生化管的名字也做了調整。

  現將變動(dòng)內容進(jìn)行詳細比較，方便操作人員正確選用產(chǎn)品和進(jìn)行試驗操作。

二、詳細比較

   新版標準（2023版）相對舊版標準（2016版）變更的內容詳細列舉如表1。

表1  新舊標準變更內容詳細比較表格

三、變化解讀

  從對比表中不難看出，新版標準中，

  （1）術(shù)語(yǔ)和定義，更加具體完善，明確列出乳酸菌是“不能液化明膠、不產(chǎn)生吲哚、革蘭氏陽(yáng)性、無(wú)運動(dòng)、無(wú)芽孢、觸酶陰性、硝酸還原酶陰性及細胞色素氧化酶陰性反應的細菌”；

  （2）設備和材料中，設備增加了“厭氧培養裝置：厭氧培養箱、厭氧罐、厭氧袋或能提供同等厭氧效果的裝置”，“實(shí)時(shí)定量PCR儀、恒溫水浴鍋或金屬浴、離心機：離心力>10000×g”，“無(wú)菌平皿：直徑90mm”、“PCR管”，同時(shí)對冰箱的溫度范圍和移液器吸頭的的量程及電子天平的精確度都做了完善或調整；

  （3）樣品處理過(guò)程中，引入了“稀釋液”，不再使用“生理鹽水”；

  （4）檢驗程序中，增加了“乳桿菌計數”的操作步驟，所有的培養時(shí)間均由原來(lái)的“72h±2h”改成“48h-72h”。

  （5）稀釋和培養過(guò)程中，新增了“經(jīng)特殊技術(shù)（如包埋技術(shù)）處理的含乳酸菌食品應按照相應技術(shù)/工藝要求進(jìn)行稀釋”；

  （6）培養基的溫度，由“48℃”，改為“48℃~50℃”，培養基的傾注量，由“15mL”改為“15mL~20mL”；

  （7）菌落計數和結果表述及報告，均簡(jiǎn)化描述，直接與GB4789.2對接，采用“見(jiàn)GB 4789.2”相關(guān)部分這種表述方式；

  （8）菌種純培養，描述為“嗜熱鏈球菌接種于MC瓊脂平板，置36℃±1℃有氧培養48h，乳桿菌屬接種于MRS瓊脂平板置36℃±1℃厭氧培養48h”更加準確。

  （9）菌種鑒定，引入實(shí)時(shí)熒光PCR法。

  （10）除了新增鑒定方法外，對重要的培養基配方也進(jìn)行了優(yōu)化，常用的MRS、MC培養基，在配方和制備條件上都有更新，舊標準中所有的高壓滅菌條件均為121℃高壓滅菌15min~20min，新版標準中，全部改為“121℃高壓滅菌15min”。

四、新產(chǎn)品展示

  順應標準的更新，我們對相關(guān)培養基也做了變更，除正常銷(xiāo)售現行標準（2016版）配套培養基外，還及時(shí)引入了新標準（2023版）中新增和有所變化的培養基，現將對應的產(chǎn)品信息列入下表（表2），相關(guān)人員可根據自己的實(shí)際情況選擇購買(mǎi)、使用。有關(guān)新產(chǎn)品的詳細情況，還可參考：

  青島海博--GB4789.35-2023乳酸菌檢驗中涉及到培養基變化的列表 點(diǎn)擊查看

表2  新舊標準中涉及的部分培養基及編號

注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。

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