一、用途及試驗原理
用途:本培養基一般用于亞硫酸還原梭狀芽孢桿菌的計數。
原理:胰蛋白胨和酵母浸粉用于提供氮源,檸檬酸鐵銨和亞硫酸鈉提供還原性并產(chǎn)生硫化氫使菌落呈黑色,多粘菌素B和硫酸新霉素可以抑制非還原性梭狀芽孢桿菌的生長(cháng),瓊脂為凝固劑。
二、培養基配方(g/L)
胰蛋白胨 |
15.0 |
酵母浸粉 |
10.0 |
亞硫酸鈉 |
1.0 |
檸檬酸鐵銨 |
0.5 |
瓊脂 |
16.0 |
pH值7.6±0.1(25℃) |
三、試驗方法
1、稱(chēng)取本品42.5g,加熱溶解于1000mL蒸餾水中,分裝,每瓶200mL,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至45℃-50℃時(shí),無(wú)菌加入一支多粘菌素B(4μg,HB0304-2a)和一支硫酸新霉素(100μg,HB0304-2b),混勻,傾入無(wú)菌平皿,備用。
2、制備質(zhì)控菌液,接種到該培養基上。
3、放置于37℃±1℃恒溫培養箱中,厭氧培養24h-48h。
四、質(zhì)控結果
接種以下質(zhì)控菌株,放置37℃±1℃恒溫培養箱中,厭氧培養24h-48h。結果如圖1所示。
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
回收率 |
生長(cháng)情況 |
其他特征 |
產(chǎn)氣莢膜梭菌 |
ATCC 13124 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落 |
產(chǎn)氣莢膜梭菌B型 |
/ |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
/ |
- |
抑制 |
圖1 亞硫酸鐵多粘菌素B瓊脂的微生物質(zhì)控結果
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