一、產(chǎn)品原理及介紹
沙門(mén)氏菌屬腸桿菌科,革蘭氏陰性腸道桿菌。菌體大。0.6~0.9)×(1~3)微米無(wú)芽胞,一般無(wú)莢膜,除雞白痢沙門(mén)氏菌和雞傷寒沙門(mén)氏菌外,大多有周身鞭毛;不液化明膠,不分解尿素,不產(chǎn)生吲哚,不發(fā)酵乳糖和蔗糖,能發(fā)酵葡萄糖、甘露醇、麥芽糖和衛芽糖,大多產(chǎn)酸產(chǎn)氣,少數只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。
培養基用途:用于飼料中沙門(mén)氏菌分離培養。
原理:蛋白胨、酵母浸粉和牛肉浸粉作為營(yíng)養物質(zhì)提供菌體細胞生長(cháng)所需要的氮源、維生素、氨基酸及生長(cháng)因子等;磷酸鹽為菌體生長(cháng)提供相對穩定的酸堿緩沖體系;乳糖、蔗糖為可發(fā)酵的糖類(lèi);酚紅指示劑在pH值為6.8時(shí)呈黃色,8.1時(shí)呈粉紅色,發(fā)酵糖產(chǎn)酸的菌落呈黃色,不發(fā)酵糖的菌落為紅色;煌綠抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和大多數非沙門(mén)氏菌的革蘭氏陰性桿菌,通常抑制發(fā)酵乳糖、蔗糖的細菌;瓊脂是培養基的凝固劑。
二、培養基配方(g/L)
蛋白胨 |
10.0 |
酵母浸粉 |
3.0 |
牛肉浸粉 |
5.0 |
磷酸氫二鈉 |
1.0 |
磷酸二氫鈉 |
0.6 |
乳糖 |
10.0 |
蔗糖 |
10.0 |
酚紅 |
0.09 |
煌綠 |
0.0125 |
瓊脂 |
15.0 |
pH值7.0±0.1(25℃) |
三、試驗方法
1、稱(chēng)取本品54.7g,加熱攪拌煮沸,完全溶解于1000mL蒸餾水中,冷卻至50℃-55℃左右時(shí),傾入無(wú)菌平皿備用。無(wú)需高壓滅菌,當天制備當天使用。
2、制備質(zhì)控菌液接種于培養基上。
3、放置于36℃±1℃需氧培養20h-24h,觀(guān)察試驗結果。
四、質(zhì)控結果
接種以下質(zhì)控菌株,放置于36℃±1℃需氧培養20h-24h。結果如圖1。
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
回收率 |
生長(cháng)情況 |
其他特征 |
鼠傷寒沙門(mén)氏菌 |
ATCC 14028 |
10-100 |
≥50% |
+++ |
紅色菌落 |
腸炎沙門(mén)氏菌 |
CMCC(B) 50760 |
10-100 |
≥50% |
+++ |
紅色菌落 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
/ |
- |
抑制 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
100-1000 |
/ |
- |
抑制 |
福氏志賀氏菌 |
ATCC 13124 |
100-1000 |
/ |
- |
抑制 |
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![]() |
鼠傷寒沙門(mén)氏菌ATCC 14028 |
腸炎沙門(mén)氏菌CMCC 50760 |
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![]() |
大腸埃希氏菌ATCC 25922 |
金黃色葡萄球菌ATCC 2592 |
![]() |
|
福氏志賀氏菌ATCC 13124 |
圖1 酚紅煌綠瓊脂培養基微生物質(zhì)控結果
五、注意事項
1、該培養基在進(jìn)行煮沸加熱滅菌時(shí),沸騰后易有橙紅色泡沫溢出,應注意在沸騰后關(guān)注液面上升速度。
2、該培養基倒板冷卻后平板整體呈橘紅色,在接菌試驗完畢進(jìn)行菌落計數時(shí),可能不易辨別紅色菌落,可使用燈檢箱或打輔助光等方式進(jìn)行計數。
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注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。
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