多聚物介導法

聚乙二醇（PEG）和多聚賴(lài)氨酸等是協(xié)助DNA轉移的常用多聚物，尤以PEG應用最廣。這些多聚物與二價(jià)陽(yáng)離子（如Mg²⁺、Ca²⁺、Mn²⁺等）及DNA混合后，可在原生質(zhì)體表面形成顆粒沉淀，使DNA進(jìn)入細胞內。

這種方法常用于酵母細胞以及其他真菌細胞，也可用于動(dòng)物細胞。處于對數生長(cháng)期的細胞或菌絲體用消化細胞壁的酶處理變成球形體后，在適當濃度的聚乙二醇6000（PEG6000）的介導下就可將外源DNA導入受體細胞中。

將外源基因導入哺乳動(dòng)物細胞還可以采用磷酸鈣或DEAE-葡聚糖介導的轉染法。這是一種進(jìn)行瞬時(shí)表達的常規方法。哺乳動(dòng)物細胞能捕獲黏附在細胞表面的DNA-磷酸鈣沉淀物，并能將DNA轉入細胞中，從而實(shí)現外源基因的導入。

在實(shí)驗中，先將重組DNA同C_aCl₂混合制成C_aCl₂-DNA溶液，隨后加入磷酸鈣形成 DNA-磷酸鈣沉淀，黏附在細胞表面，通過(guò)細胞的內吞作用進(jìn)入受體細胞，達到轉染目的。

DEAE（二乙胺乙基葡聚糖）是一種高分子多聚陽(yáng)離子材料，能促進(jìn)哺乳動(dòng)物細胞捕獲外源DAN分子。其作用機制可能是DEAE與DNA結合后抑制了核酸酶的活性，或DEAE與細胞結合后促進(jìn)了DNA的內吞作用。

脂質(zhì)體（liposome）是人工構建的由磷脂雙分子層組成的物質(zhì)，成膜狀結構。在形成脂質(zhì)體時(shí)，可把用來(lái)轉染的目標DNA分子包在其中，然后將該種脂質(zhì)體與細胞接觸，就將外源DNA分子導入受體細胞。脂質(zhì)體介導法的原理是：受體細胞的細胞膜表面帶負電荷，脂質(zhì)體顆粒帶正電荷，利用不同電荷間引力，就可將DNA、mRNA及單鏈RNA等導入細胞內。

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