雙歧桿菌的活化及保存

一、雙歧桿菌簡(jiǎn)介

 雙歧桿菌屬（Bifidobacterium）是嚴格厭氧的革蘭氏陽(yáng)性桿菌，一端通常呈現分叉狀，是人和動(dòng)物腸道中益生菌之一，可以分解多種碳水化合物產(chǎn)生乳酸，也屬于乳酸菌。

雙歧桿菌生長(cháng)需要嚴格的厭氧環(huán)境，氧氣會(huì )對雙歧桿菌產(chǎn)生毒害作用，導致雙歧桿菌死亡，但在二氧化碳存在的條件下，對于低濃度的氧氣具有一定的耐受性，通常使用BBL培養基/TPY培養基/MRS培養基進(jìn)行培養，培養基中常添加半胱氨酸做為還原劑幫助維持厭氧環(huán)境。

二、活化方法

培養基的選擇：MRS肉湯/瓊脂、TPY肉湯/瓊脂、BBL肉湯/瓊脂培養基均可。

培養環(huán)境：可使用厭氧培養箱、厭氧罐等設備。

操作方法：若菌種為凍干粉形式，按照說(shuō)明書(shū)溶解后，可直接涂布或劃線(xiàn)至MRS/TPY/BBL平板上，也可加入至液體培養基中；若菌種為甘油凍存管形式，從冰箱中取出速融后，涂布或劃線(xiàn)至MRS/TPY/BBL平板上，也可加入至液體培養基中。

注：由于氧氣對雙歧桿菌具有毒害作用，因此進(jìn)行雙歧桿菌的操作時(shí)，應在厭氧操作箱中進(jìn)行。若在正�？諝庵胁僮�，應盡可能快的完成操作，從接種開(kāi)始到平板放入厭氧環(huán)境中培養整個(gè)流程的時(shí)間，應盡可能控制在15min以?xún)�，長(cháng)時(shí)間暴露在空氣中易導致雙歧桿菌死亡。

三、實(shí)驗室常用保存方法

雙歧桿菌的保存可使用甘油/脫脂牛奶菌種保存管低溫冷凍保存。挑取非選擇性培養基上培養好的雙歧桿菌至脫脂牛奶/液體菌種保存管中制成約10⁸-10⁹CFU/mL的菌液，置于超低溫冰箱或液氮罐中冷凍保存，在-70℃以下可保存兩年以上。

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