轉化

對于原核細胞，常采用轉化將目的基因導入受體細胞。原核細胞的轉化過(guò)程就是一個(gè)攜帶基因的外源DNA分子通過(guò)與膜結合進(jìn)入受體細胞、并在胞內復制和表達的過(guò)程。轉化過(guò)程包括制備感受態(tài)細胞和轉化處理。

感受態(tài)細胞（competentcells）是指處于能攝取外界DNA分子的生理狀態(tài)的細胞。在制備感受態(tài)細胞時(shí)，應注意：

① 在最適培養條件下培養受體細胞至對數生長(cháng)期，培養時(shí)一般控制受體細胞密度OD₆₀₀在0.4左右；

② 制備的整個(gè)過(guò)程控制在0～4℃；

③ 為提高轉化率，常選用CaCl₂溶液。

CaCl₂促進(jìn)轉化的機制尚不清楚，可能是CaCl₂在細胞壁上打了一些孔，DNA分子就能夠從這些孔中進(jìn)人細胞，這些孔隨后又被宿主細胞修復。

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