金黃色葡萄球菌的活化、保存及確認方法

一、金黃色葡萄球菌簡(jiǎn)介

  金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是隸屬于葡萄球菌屬的一種常見(jiàn)的條件致病性菌株，革蘭氏染色為陽(yáng)性球菌，呈葡萄狀堆積，直徑約0.5μm，具有較強的耐鹽性，可在含10%氯化鈉的培養基中生長(cháng)，是無(wú)芽孢菌中抗逆性最強的菌種之一，主要可引起傷口感染或在腸道中產(chǎn)毒導致腹瀉等癥狀。

二、活化方法

  培養基的選擇：金黃色葡萄球菌的生命力強，易存活，對營(yíng)養要求不高，常用的非選擇性培養基大多數都可以用來(lái)對金黃色葡萄球菌活化及傳代，如營(yíng)養肉湯/瓊脂、胰蛋白胨大豆肉湯/瓊脂、腦心浸液肉湯/瓊脂等。

  注：對菌種進(jìn)行活化和傳代時(shí)，通常不使用甘露醇氯化鈉瓊脂、Baird-parker瓊脂、7.5%氯化鈉肉湯等選擇性培養基。

  操作方法：若菌種為凍干粉形式，按照說(shuō)明書(shū)溶解后，可直接涂布或劃線(xiàn)至NA/TSA/BHI平板上，也可加入至NB/TSB/BHI等液體培養基中；若菌種為甘油凍存管形式，從冰箱中取出速融后，NA/TSA/BHI平板上，也可加入至NB/TSB/BHI等液體培養基中；若菌種為瓷珠形式，挑取瓷珠可轉入NA/TSA/BHI平板上，也可加入至NB/TSB/BHI等液體培養基中，30-37℃培養18-24h。

三、實(shí)驗室常用保存方法

  1.斜面保存法

  將NA/TSA/BHI等培養基制成斜面管，接種金黃色葡萄球菌后培養至菌落生長(cháng)良好，置于2-8℃可保存至少1個(gè)月，超過(guò)1個(gè)月容易出現菌種老化、污染、變異等現象，建議及時(shí)傳代。

  2.脫脂牛奶/甘油/瓷珠冷凍保存法

  可挑取非選擇性培養基上培養好的金黃色葡萄球菌至脫脂牛奶/液體/瓷珠菌種保存管中制成約10⁹CFU/mL的菌液（瓷珠保存法需搖勻后棄菌液保留瓷珠），置于冰箱或液氮罐中冷凍保存，在-70℃以下可保存兩年以上，在-20℃也能保存一年以上，金黃色葡萄球菌生命力強，很容易保存數年或數十年。

四、菌種的確認

  1.菌落特征：大多數金黃色葡萄球菌在TSA上菌落呈現圓形光滑菌落，并有黃色色素，也有少數金黃色葡萄球菌不產(chǎn)黃色色素。在甘露醇氯化鈉平板上由于分解甘露醇產(chǎn)酸，菌落呈黃色；在Baird-parker瓊脂上呈現黑色圓形菌落，通常菌落周?chē)鷷?huì )有渾濁帶及透明圈，也有少數金黃色葡萄球菌不分解脂肪，菌落周?chē)鷽](méi)有圈。

甘露醇氯化鈉平板	Baird-parker平板

  3.溶血：大多數金黃色葡萄球菌可以產(chǎn)生兩種以上的溶血素，在血平板上產(chǎn)生透明的β溶血環(huán)，也有少數金黃色葡萄球菌產(chǎn)溶血素少，在血平板上表現為弱溶血或不溶血。

  4.血漿凝固酶試驗：金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生血漿凝固酶，凝固兔血漿，此反應常用來(lái)做金黃色葡萄球菌的確證試驗。

注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。

上一篇：生活小知識：食物的腐敗與微生物的繁殖

下一篇：大腸埃希氏菌的活化、保存及確認方法