細菌檢測最基礎的三區劃線(xiàn)操作要點(diǎn)

  “三區劃線(xiàn)法”是實(shí)驗室最常用的平板劃線(xiàn)接種方法，通過(guò)在平板上劃線(xiàn)，將細菌在瓊脂平板表面充分地分散開(kāi)，使單個(gè)細菌能固定在一點(diǎn)上繁殖，形成單個(gè)菌落，以達到分離純化地目的，常常分三個(gè)區域進(jìn)行劃線(xiàn)，故稱(chēng)為“三區劃線(xiàn)法”。

  “三區劃線(xiàn)法”的操作：第一區起始位置可反復劃線(xiàn)，然后之字形劃線(xiàn)，劃線(xiàn)區域不超過(guò)平板1/3；第二區，平板旋轉60度，之字形劃線(xiàn)，最初的幾條線(xiàn)與第一區的右側末端交叉且之字劃線(xiàn)，之后連續劃線(xiàn)不再與一區接觸；第三區，平板再旋轉60度，進(jìn)行三區劃線(xiàn)，規則與第二區劃線(xiàn)相同。各區首尾相接，菌量逐步減少，達到形成單個(gè)菌落的目的。

為什么劃不出單菌落？常見(jiàn)原因如下：

  1.沒(méi)有充分利于好劃線(xiàn)區域；

  2.各區域線(xiàn)過(guò)于密集，線(xiàn)與線(xiàn)之間重疊；

  3.與前一區交叉過(guò)多；

  4.劃線(xiàn)時(shí)接種環(huán)接觸點(diǎn)變動(dòng)，未始終保持接種環(huán)的一點(diǎn)接觸瓊脂表面；

  5.未掌握好劃線(xiàn)力度與角度，劃破瓊脂；

  6.待接種的細菌菌量過(guò)多時(shí)，可在第一區劃線(xiàn)完成后進(jìn)行灼燒，再進(jìn)行第二、三區的劃線(xiàn)。

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