1、在微生物實(shí)驗室進(jìn)行平板類(lèi)培養基適用性的時(shí)候，可能會(huì )遇到以下常見(jiàn)的情況，造成試驗失敗。

  1）培養基平皿表面水珠凝聚，造成涂布培養后菌落蔓延無(wú)法計數。

  2）培養后計數結果超標。

  3）培養后沒(méi)有逐日觀(guān)察，造成菌落生長(cháng)成團，無(wú)法計數或計數結果統計錯誤。

2、原因分析及解決措施

情況①：培養基平皿表面水珠凝聚的原因在于澆碟的時(shí)候，培養基溫度高，在平皿表面會(huì )形成水珠。

  解決措施：培養基平皿表面水珠凝聚

  ◆培養基制備

  培養基制備的一般流程：

  ①上午10點(diǎn)開(kāi)始用干粉培養基天平稱(chēng)重，11點(diǎn)20開(kāi)始滅菌，13:00開(kāi)鍋，在滅菌鍋中冷卻至13:30。

  ②將對照培養基置于50℃水浴鍋中待用。

  知識點(diǎn)：滅菌鍋滅菌結束時(shí)，需要及時(shí)開(kāi)鍋，避免培養基長(cháng)時(shí)間在滅菌鍋中缺氧，造成培養基品質(zhì)下降，培養基適用性失敗且影響實(shí)驗結果。

  ◆培養基澆碟

  50℃水浴鍋取出后，一般5分鐘之內將培養基澆置空平皿中。平皿冷卻后，觀(guān)察培養基表面有無(wú)水珠，若無(wú)水珠則可直接進(jìn)行涂布操作。多余的培養基可以放置在生物安全柜中或置密封袋（不是呼吸袋）里2-8℃保存。

  若有水珠，若需要當天使用則打開(kāi)平皿蓋，輕輕甩掉表面的水珠，在運行的生物安全柜中放置0.5-1h直到表面沒(méi)有水珠，然后進(jìn)行涂布計數。

  若不需要當天使用：

  直接放置在生物安全柜中，蓋上平皿，生物安全柜關(guān)機，7天內使用。

  裝入自封袋中保存在2-8℃冰箱中，2周內使用。使用前，提前一天取出，使平皿中水珠自動(dòng)蒸發(fā)消失。

情況②：培養后計數結果超標的原因在于菌懸液制備不均勻。

  每次制備的時(shí)候要渦旋3000轉30s，使用前再渦旋3000轉10s。特別是黑曲霉和白色念珠菌這種容易在底部沉底的菌，尤其需要注意。

情況③：培養后沒(méi)有逐日觀(guān)察，造成菌落生長(cháng)成團。

  無(wú)法計數或計數結果統計錯誤，可以參考下圖解決這個(gè)問(wèn)題。

文章來(lái)源：微信公眾號微生物菌種網(wǎng)

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