食品中的沙門(mén)氏菌檢驗-樣品處理注意事項

一、簡(jiǎn)介：

  對食品中的微生物進(jìn)行檢驗之前要對樣品進(jìn)行處理。樣品不同，要檢驗的微生物不同，處理方式也會(huì )有所差別。按照食品檢驗國家標準，人們日常生活中食用的肉類(lèi)、乳制品類(lèi)、蛋及蛋制品類(lèi)、冷凍飲品等，都需要進(jìn)行沙門(mén)氏菌的檢驗（如圖1）。

圖1 規定需要檢驗沙門(mén)氏菌的各種標準

本文主要對食品中沙門(mén)氏菌的檢驗所涉及的樣品處理過(guò)程進(jìn)行細節說(shuō)明和討論。

二、樣品處理過(guò)程：

1、解凍

  所有待處理樣品，若為冷凍狀態(tài)，解凍過(guò)程應滿(mǎn)足：45℃以下不超過(guò)15min，或2℃～5℃不超過(guò)18h。

2、稱(chēng)量

  所取樣品應盡量均勻，盡量從所取的全部樣品中稱(chēng)取或量取所需的25g，液體樣品搖勻之后再量取25mL。也就是說(shuō)，我們拿回的樣品通常不止25g，比方說(shuō)一根或幾根火腿、一塊或幾塊雞肉、一盒雞蛋、一箱冰激凌等等，究竟怎么稱(chēng)取25g，盡量涵蓋全部樣品，這的確是個(gè)很細節的問(wèn)題，絕不是簡(jiǎn)單的隨意整出一塊稱(chēng)量25g這么簡(jiǎn)單。否則，會(huì )造成漏檢的概率增大，影響檢驗結果的客觀(guān)正確性。微生物檢驗時(shí)樣品的制備，均勻食品用四分法縮分；肉類(lèi)、水產(chǎn)類(lèi)食品用滅菌剪刀剪碎，四分法縮分（如圖2）。

圖2 四分法縮分取樣圖解

3、混勻

  稱(chēng)取的樣品，放入事先備好的盛有225mL BPW的無(wú)菌均質(zhì)杯或合適容器內，以8000r/min～10000r/min均質(zhì)1min～2min，或置于盛有225mL BPW的無(wú)菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1min～2min（如圖3）。

圖3 均質(zhì)器拍打樣品混勻

  若樣品為液態(tài)，則不需要均質(zhì)，振蕩混勻即可（如圖4）。

圖4 液體樣品振蕩混勻

  如需調整pH，用1mol/mL無(wú)菌NaOH或HCl調pH至6.8±0.2。

4、轉移

  無(wú)菌操作將樣品轉至500mL錐形瓶或其他合適容器內（如均質(zhì)杯本身具有無(wú)孔蓋，可不轉移樣品），如使用均質(zhì)袋，可直接進(jìn)行培養，于36℃±1℃培養8h～18h。這一過(guò)程通常稱(chēng)為“預增菌”，所用的培養基為BPW（緩沖蛋白胨水），培養基中不含抑制成分，有利于受損細胞修復至穩定的生化狀態(tài)，目的在于盡量修復樣品中的一些受損菌體，最大程度地保證目標菌的檢出。

5、選擇性增菌

  輕輕搖動(dòng)培養過(guò)的樣品混合物，移取1mL，轉種于10mL TTB內，42℃±1℃培養18h～24h。

同時(shí)，另取1mL，轉種于10mL SC內，于36℃±1℃培養18h～24h。

    培養后的TTB和SC試管狀態(tài)如下（圖5）：

圖5 用TTB和SC增菌培養后的樣品

  用這些培養好的TTB和SC試管，進(jìn)行后續的選擇性分離操作。

6、產(chǎn)品選擇

  樣品處理過(guò)程中，可選用的產(chǎn)品如下（表1、圖6），實(shí)驗室人員可根據需求，自行選取合適的培養基、均質(zhì)袋進(jìn)行組合使用。

表1  食品中沙門(mén)氏菌檢驗 樣品處理過(guò)程可用的產(chǎn)品

圖6-1 緩沖蛋白胨水（BPW）干粉和即用型產(chǎn)品

圖6-2 各種樣式的均質(zhì)袋

圖6 沙門(mén)氏菌檢驗樣品處理可選用的產(chǎn)品

注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。

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