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Honda氏產(chǎn)毒肉湯的原理和使用方法

張宇名
錄入時(shí)間:2023-5-18 15:04:23 來(lái)源：青島海博生物

一、試驗原理

本培養基用于致瀉大腸埃希氏菌產(chǎn)毒培養，致瀉性大腸埃希氏菌分為：產(chǎn)腸毒素性大腸埃希氏菌（ETEC）、腸道侵襲性大腸埃希氏菌（EIEC）、腸道致病性大腸埃希氏菌（EPEC）、腸集聚性黏附性大腸埃希氏菌（EAEC）和腸出血性大腸埃希氏菌（EHEC）5種。

酪蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、維生素和生長(cháng)因子；氯化鈉維持細菌平衡的滲透壓；磷酸氫二鉀具有緩沖作用；葡萄糖為可發(fā)酵糖類(lèi)；硫酸鎂促進(jìn)微生物生長(cháng)發(fā)育；氯化鐵、氯化鈷能促進(jìn)微生物毒素的產(chǎn)生；林可霉素（潔霉素）用于抑制厭氧菌和革蘭陽(yáng)性球菌生長(cháng)，對革蘭陰性菌以及真菌無(wú)活性。

二、培養基配方（g/L）

酪蛋白胨	20.0
酵母浸粉	10.0
氯化鈉	2.5
磷酸氫二鉀	15.0
葡萄糖	5.0
硫酸鎂	0.025
氯化鐵	0.0025
氯化鈷	0.01
pH 7.5±0.1（25℃）

三、試驗方法

1、稱(chēng)取本品52.54g，加熱溶解于1000mL蒸餾水中，121℃高壓滅菌15分鐘，待冷卻至45℃-50℃左右時(shí)，加入過(guò)濾除菌的林可霉素溶液（90μg/mL），混勻備用。

2、制備菌種懸液，接種至Honda氏產(chǎn)毒肉湯中。

3、放置于36℃±1℃恒溫培養箱中，需氧培養18h-24h。

四、質(zhì)控結果

接種以下質(zhì)控菌株，放置36℃±1℃恒溫培養箱中，需氧培養18h-24h。菌株培養結果見(jiàn)圖1。

質(zhì)控菌株	菌株編號	接種量（CFU）	生長(cháng)情況	其他特征
大腸埃希氏菌	ATCC 8739	10-100	+++	渾濁
大腸埃希氏菌	ATCC 25922	10-100	+++	渾濁

圖1 Honda氏產(chǎn)毒肉湯的微生物質(zhì)控結果

五、注意事項

1、培養基中含少量硫酸鎂、氯化鈷、氯化鐵，滅菌后可能出現微量沉淀。

2、林可霉素屬于林可酰胺類(lèi)抗生素，121℃高溫易產(chǎn)生分解影響其功效，故采用過(guò)濾除菌方式在Honda氏產(chǎn)毒肉湯高壓滅菌冷卻后加入，務(wù)必避免一同高壓滅菌。

相關(guān)產(chǎn)品：

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注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。

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