一、培養基傾注溫度
1.培養基的傾注時(shí)適宜溫度約48℃。培養基置手心感覺(jué)不燙,但是置手背感覺(jué)燙時(shí),培養基溫度大約就是48℃。培養基傾注時(shí)溫度太高的話(huà),凝固時(shí)間較長(cháng),另外皿蓋上會(huì )有大量冷凝水,不利于后續實(shí)驗。溫度太低則容易出現倒板過(guò)程中瓶中培養基部分凝固的現象。
2.有些培養基需要加入添加成分,這些添加成分在加入前應先放置到室溫,避免冷的液體造成瓊脂凝結或形成片狀物。
3.目前多數實(shí)驗室培養基滅菌后會(huì )放置水浴或者烘箱中,需使用的時(shí)候拿出來(lái)直接倒板。但培養基靜置時(shí)間不宜過(guò)長(cháng),靜置時(shí)間一般不超過(guò)4小時(shí)。靜置時(shí)間過(guò)長(cháng),培養基中瓊脂可能會(huì )少量凝固,形成類(lèi)似絮狀析出。
4.在實(shí)驗過(guò)程中不可避免因特殊情況而導致未倒板培養基已凝固,凝固后培養基可重新加熱溶解。一般來(lái)說(shuō)沸水浴或者電磁爐加熱,不能重新再滅一次菌。
二、傾注量
一般平板傾注量在18-20ml左右,如果培養時(shí)間超過(guò)48小時(shí)或者是培養溫度高于40℃,為防止水分過(guò)量蒸發(fā)導致平板開(kāi)類(lèi),傾注量一般是25ml左右。一些培養皿會(huì )有刻度,按照刻度傾注即可。
三、平板氣泡
倒板過(guò)程中容易出現氣泡,特別是像BS瓊脂這類(lèi)需要搖勻后倒板的培養基。氣泡過(guò)多的話(huà)會(huì )影響結果觀(guān)察,倒平板時(shí)盡量緩慢倒入,將氣泡留在瓶子底部。平板中有少量氣泡的話(huà),可以把氣泡搖到平板壁上,這樣不會(huì )影響結果觀(guān)察。
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