非選擇性分離/計數固體培養基的出廠(chǎng)檢驗及驗收方法

一、非選擇性分離/計數固體培養基的介紹

  非選擇性分離/計數固體培養基常用于細菌的計數、活化、分離純培養等用途，含瓊脂一般為1.2%-1.5%，可使用傾注法計數或制成平板涂布法計數使用，也可制成斜面用于菌種的傳代保存，常見(jiàn)的有平板計數瓊脂（PCA）、營(yíng)養瓊脂（NA）、胰蛋白胨大豆瓊脂（TSA）等，培養基的組成為基礎營(yíng)養成分，無(wú)抑制性，一般不具有針對性，適用于大多數細菌的培養。

二、培養基的出廠(chǎng)檢驗-生長(cháng)率測定

  1.菌液制備

  將質(zhì)控菌株接種至非選擇性肉湯或平板中進(jìn)行活化培養（通�？墒褂肨SB或TSA），使用生理鹽水或磷酸鹽緩沖液進(jìn)行十倍系列稀釋至適宜梯度。

  2.培養基準備

  將待測培養基及參比培養基按標簽制備進(jìn)行滅菌，制成平板備用（若采用傾注法接種，可將滅菌后的培養基置47-50℃水浴保溫備用）。細菌通常用TSA做參比培養基，真菌通常使用SDA，有特殊營(yíng)養要求的菌可選用適宜的無(wú)抑制性培養基做為參比培養基。

  3.接種及培養

  吸取0.1mL制備好的菌懸液，分別涂布至待測培養基和參比培養基，每平板接種水平為20-200CFU，至少接種2塊平板，將接種好的培養基置于標準規定的條件下進(jìn)行培養。

  4.結果計算及判定

  生長(cháng)率PR=NS（待測平板菌落總數）/NO（參比培養基平板菌落總數，應≥100CFU），目標菌在待測培養基上應有典型的生長(cháng)，生長(cháng)率應不小于0.7。

三、培養基的驗收方法

  將質(zhì)控菌株接種至非選擇性肉湯培養基中過(guò)夜培養制成工作菌懸液，使用1μL接種環(huán)挑取1環(huán)菌液，按照標準的方法連續劃16線(xiàn)，置于標準規定的溫度培養，如果僅一半的線(xiàn)有稠密菌落生長(cháng)，則G為0.5。如果劃線(xiàn)上沒(méi)有菌落生長(cháng)、生長(cháng)量少于劃線(xiàn)的一半或菌落生長(cháng)微弱，則G為0，計算G值總和，應達到G≥6。

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