進(jìn)行微生物品管檢測時(shí),常以細菌數目的多少,搭配法規標準作為質(zhì)量判斷的依據,進(jìn)而決定該批產(chǎn)品是否合格。但進(jìn)行了這么多次品管計劃,閱讀了這么多份檢驗報告,您是否注意過(guò)微生物的數據呈現有CFU與MPN兩個(gè)不同的單位呢?這兩個(gè)單位分別代表什么意義呢?
CFU是菌落形成單位
CFU 是菌落形成單位(Colony-forming unit)的縮寫(xiě),是指樣品在適當的稀釋狀態(tài)下,每一個(gè)細菌細胞在培養基上,生長(cháng)繁殖所形成的單一易區別菌落,每菌落單位稱(chēng)為1 CFU。
· CFU/g :每公克樣品中含有的細菌菌落總數。
· CFU/mL:每毫升樣品中含有的細菌菌落總數。
· CFU/c㎡:每平方公分樣品中含有的細菌菌落總數。
此計算方式便于判別產(chǎn)品衛生狀況或微生物污染程度,數字越大表示樣品中微生物含量越多,數字越小表示越少微生物存在。然而還是有所缺點(diǎn),一方面樣品中的細菌可能因處理時(shí)受到傷害死亡,一方面因微生物本身對于氧氣、溫度、營(yíng)養等生存條件的需求差異,在培養條件下無(wú)法生長(cháng)形成菌落,不過(guò)這些死亡或無(wú)法生長(cháng)的細菌并非我們主要的實(shí)驗標的或不會(huì )影響測試目的,因此并不會(huì )顯著(zhù)影響實(shí)驗結果所呈現的意義。
培養基上每個(gè)菌落形成單位(Colony-forming unit)
MPN是最大可能數
MPN 是最大可能數(Most probable number)的縮寫(xiě),又稱(chēng)稀釋培養計數法,結合微生物學(xué)與統計學(xué)的檢測數值表示法,數字并非實(shí)際細菌數目,而是通過(guò)統計模型,推算實(shí)際菌數最可能落在信賴(lài)區間的位置,即該樣品最可能有多少細菌的估測值。
相較于CFU方法直接計算培養出來(lái)的真實(shí)菌落數,MPN法必須將樣品備制成3個(gè)連續10倍稀釋的系列稀釋液,每稀釋系列進(jìn)行3次重復的液體培養基的接種培養(注一),即所謂的“三階3支”稀釋培養法,通過(guò)培養后觀(guān)察到的微生物生長(cháng)正反應數目,去比對MPN表(最大可能數表)查出該微生物最大機率的可能數目,最終檢驗結果以樣品的每單位重量或容量所含MPN數,即以MPN/g或MPN/mL為單位表示之。
MPN 的缺點(diǎn)除為估計值外,操作步驟繁瑣復雜,從培養基的配置、細菌的轉移接種、正反應的判定、MPN數值的換算,甚至更有部分目標細菌須搭配菌種鑒定來(lái)確認實(shí)驗結果,較耗時(shí)費力。
最大可能數(Most probable number)法簡(jiǎn)易流程圖
注一:
視實(shí)驗方法不同,每個(gè)稀釋系列可能會(huì )做到5次重復的液體培養基的接種培養,即“三階5支”。
CFU和MPN 的差別比較
· CFU 單位是建立在以平板固態(tài)培養基滋長(cháng)細菌后,實(shí)際統計的真實(shí)菌落數。
· MPN 單位則是觀(guān)察發(fā)酵管中的液態(tài)培養基細菌滋長(cháng)情形,然后以統計學(xué)推估的最可能細菌數目。
兩者依據不同的實(shí)驗方法、不同的統計基礎下,呈現不同的微生物數量表示單位,雖然兩者有所差異,但從《食品安全國家標準管理辦法》的指標菌及致病菌檢驗方法可以看到,不同的微生物檢測項目可能以不同單位表示,端看實(shí)驗進(jìn)行方式,并無(wú)優(yōu)劣與否、孰者為先的問(wèn)題。
單位表示 |
菌落形成單位(CFU)
Colony-forming unit
|
最大可能數(MPN) Most probable number |
實(shí)驗方法說(shuō)明 |
以?xún)A注法或涂抹法在平板固態(tài)培養基滋長(cháng)細菌,實(shí)際統計真實(shí)菌落數 |
觀(guān)察發(fā)酵管中的液態(tài)培養基細菌滋長(cháng)情形,然后以統計學(xué)推估最可能的細菌數 |
實(shí)驗方法比較 |
實(shí)驗步驟較簡(jiǎn)便 |
實(shí)驗步驟復雜 |
數據判讀說(shuō)明 |
預設每顆菌落皆由單一細菌繁殖形成,直接計數平板上的菌落數來(lái)推論菌數 |
樣品可使用范圍較大,可用于不可過(guò)濾之樣品。以“三階3支”稀釋培養之微生物生長(cháng)正反應數目,比對MPN表(最大可能數表)查出微生物最可能數目 |
數據判讀比較 |
CFU為真實(shí)數值 |
MPN為統計推估值 |
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