濕熱法就是利用水蒸氣的熱量將物品滅菌。濕熱滅菌時(shí),微生物死亡與細胞蛋白質(zhì)等大分子變性有關(guān),其 Q10值比干熱滅菌的高,對芽抱 (在100~135℃)約為8~10,對營(yíng)養細胞則更高,因此,濕熱滅菌比干熱滅菌更有效。濕熱滅菌具有經(jīng)濟和快速等特點(diǎn),廣泛用于培養基和發(fā)酵設備等的滅菌。常用濕熱法有以下幾種:
(1)巴斯德消毒法
19世紀60年代,由巴斯德發(fā)展起來(lái)的。將待消毒的液體食品置于60~85℃下處理15s~30min,然后迅速冷卻。該法主要針對牛奶、啤酒、果酒和醬油等不易長(cháng)時(shí)間高溫滅菌的液體食品。其目的是殺死無(wú)芽抱的病原菌(如牛奶中的結核桿菌和沙門(mén)桿菌),但又能保持食品的風(fēng)味,而且處理后的牛奶等飲料可存放長(cháng)達 6個(gè)月。
(2)煮沸消毒法
將飲用水加熱至100℃,煮沸數分鐘,以達到消毒的目的。在條件有限的情況下,可采用該法消毒物品。
(3)間歇滅菌法,或稱(chēng)丁達爾滅菌法
在 80~100℃蒸煮15~60min,再擱置室溫(28~37℃)下過(guò)夜,并重復以上過(guò)程三遍以上。其中蒸煮過(guò)程可以殺死微生物的營(yíng)養體,但不能殺死芽抱,室溫過(guò)夜促使芽抱萌發(fā)形成營(yíng)養體,再經(jīng)蒸煮過(guò)程可殺死新的營(yíng)養體,循環(huán)三次以上可以保證徹底殺死包括芽抱在內的微生物。這種方法可以在較低的溫度下,達到徹底滅菌的目的,對設備的要求較低,適用于不耐高溫的物品滅菌,但其缺點(diǎn)是費時(shí)。
(4)常規加壓滅菌法
蒸汽加壓滅菌是目前應用最廣、最有效的滅菌手段。實(shí)驗室常用高壓蒸汽鍋滅菌,該法適用于一切微生物實(shí)驗室、醫療保健單位和工廠(chǎng)菌種室的培養基、器材和其他物料的滅菌。
(5)連續滅菌法
將培養基在發(fā)酵罐外按需要連續不斷地加熱、保溫和冷卻,然后送入發(fā)酵罐內。一般采用 135~140℃、5~15s短暫的加熱過(guò)程,然后需要在維持罐內繼續保溫5~8min,以達到徹底滅菌的目的。
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