微生物染色法

大多數微生物細胞極其微小又十分透明，用水浸片或懸滴觀(guān)察法在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀(guān)察時(shí)，只能看到大體形態(tài)和運動(dòng)情況。若要在光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察其細微形態(tài)和主要構造，一般都要對細胞進(jìn)行染色。即用染料將細胞染色，以增加在明視野顯微鏡下的反差，以便于觀(guān)察細胞的形態(tài)。

1、微生物染色法分類(lèi)

（1）死菌，可采用正染法和負染法。

① 正染：利用染料與細胞組分結合而進(jìn)行的染色過(guò)程。它可分為簡(jiǎn)單染色 和復合染兩種。若一個(gè)生物材料只用一種染料染色稱(chēng)為單染，采用兩種以上的染料對細胞的不同結構進(jìn)行復合染色，使各種細胞通過(guò)染色后呈現差異的染色過(guò)程稱(chēng)為復染或差染。如：革蘭染色，芽抱染色等。

② 負染：與正染結果相反，細胞不染色而使背景染色，以便看清細胞的輪廓。這些染料不能與細胞組分結合，為不透明染料。如:印度墨水，碳素墨水等。

（2）活菌，可用美藍或 TTC(氯化三苯基四氮)等作活菌染色；

2、常用的染料

大多數染料都是有機化合物 (中性有機鹽)�？煞譃橐韵氯�種類(lèi)型:

（1）堿性染料或稱(chēng)帶正電染料

這類(lèi)染料較常使用，染料的堿基 (即子陽(yáng)離子部分)會(huì )是發(fā)色基團，可與細胞中酸性組分(帶負電的)結合，如核酸和酸性多糖等。有的菌體蛋白質(zhì)的等電點(diǎn) pI為4~5，在pH>pI條件下，帶負電。菌體細胞表面一般也帶電。這樣堿性染料可與一些蛋白和細胞表面結合。這類(lèi)染料有孔雀綠(又稱(chēng)堿性綠)，結晶紫，堿性品紅(又稱(chēng)復紅)，沙黃和美蘭等。

（2）酸性染料或稱(chēng)帶負電染料

酸性染料與堿性染料正好相反。染料的酸根(即陰離子部分)為發(fā)色結構，它可與細胞中帶正電的組成成分結合，如許多蛋白質(zhì)。這類(lèi)染料有伊紅，酸性品紅 和剛果紅等。

（3）其他染料

如脂溶性染料 (如蘇丹黑)可與細胞中脂類(lèi)結合，可觀(guān)測脂類(lèi)的存在位置。

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