營(yíng)養缺陷型的鑒定方法

獲得的營(yíng)養缺陷型菌株還應進(jìn)一步確認其生長(cháng)的所需物。菌株較少時(shí)，可用生長(cháng)譜法，若菌株較多時(shí)，常采用組合補充培養基法。

1、生長(cháng)譜法

將待測菌接到斜面擴增培養，經(jīng)離心洗滌除去細胞外吸附的營(yíng)養物質(zhì)，再涂布在基本培養基平板，每塊平板涂布10⁵個(gè)以上的細胞。也可將待測菌與融化的固體基本培養基混合均勻后倒入培養皿，待培養基凝固后，在平板上分區域放置少量不同的營(yíng)養物或蘸有不同營(yíng)養物的無(wú)菌濾紙片并保溫培養。從每種營(yíng)養物區域內該菌的生長(cháng)情況，判斷對營(yíng)養的需求。

測定一般應分兩階段。第一階段應確定是哪類(lèi)物質(zhì)的缺陷型。將濾紙分別蘸取酪素水解液(氨基酸混合液)、水溶性維生素、核酸水解液和酵母浸出汁，等距離地放入平板中。這樣形成生長(cháng)譜以及由此確定營(yíng)養缺陷型類(lèi)別。酪素水解液、水溶性維生素、核酸水解液分別對應于氨基酸缺陷型、維生素缺陷型和堿基缺陷型。無(wú)論哪種類(lèi)型的營(yíng)養缺陷型都能在酵母浸出汁周?chē)�生長(cháng)。

第二階段應根據第一階段確定的范圍，再進(jìn)一步確定是哪種具體化合物的缺陷型。如果第一階段確定是氨基酸缺陷型，那就需要確定是哪一種氨基酸缺陷型。

如果不是有針對性地篩選某幾種營(yíng)養物的缺陷型，那需要做較多的測定，可采用組合營(yíng)養物法。如已確定是15種營(yíng)養物質(zhì)中某一物質(zhì)的缺陷型，可以將15種物質(zhì)分成5組 (也可將21 種物質(zhì)分6 組)。以五張濾紙分別蘸取該5個(gè)組合的混合物放在涂布受檢菌的基本培養基平板上，培養后觀(guān)察可發(fā)現組合營(yíng)養物各種生長(cháng)譜的可能形式。根據生長(cháng)譜和營(yíng)養物組合可以判斷菌株的營(yíng)養缺陷型。

2、組合補充培養基法

若待測菌株較多，則可按上述的營(yíng)養物質(zhì)組合，將它們直接添加在培養基中，組成5組補充培養基，將待測的菌點(diǎn)種在各種補充培養基上，逐個(gè)分析各菌的缺陷類(lèi)型。

也可以根據需要，配制一組補充培養基，每一種補充培養基中只缺一種營(yíng)養物。那么，所有的營(yíng)養缺陷型都可用它一次性檢測，尤其是對于多種營(yíng)養物質(zhì)的營(yíng)養缺陷型。

上一篇：表型延遲現象

下一篇：基因突變的誘發(fā)因素