單克隆抗體的制備與應用

  （一）單克隆抗體的制備  
   單克隆抗體的制備過(guò)程如下：用事先設計好的抗原免疫動(dòng)物（通常是小鼠或大鼠）， 使特異B細胞克隆繁殖并產(chǎn)生大量抗體。然后取出富含B淋巴細胞的脾，加入聚乙二醇與骨髓瘤細胞融合，再放入HAT［次黃嘌呤、葉酸和胸腺嘧啶核苷］培養基 中培養，葉酸封鎖細胞 的特殊代謝用途，未融合的骨髓瘤細胞，缺乏使其能在葉酸存在下生長(cháng)的酶，故不能生長(cháng)而死亡；而未融合的脾B細胞，雖然具有對中間代謝產(chǎn)物次黃嘌呤和胸腺嘧啶的旁路途徑，但卻不能在體外培養基中生長(cháng)，而在培養1—2周后也會(huì ) 自然死亡。只有經(jīng)過(guò)融合的雜交瘤細胞能夠從融合的同伴細胞那里獲得進(jìn)行上述特定旁路途徑代謝的遺傳信息，而在HAT培養基中生 長(cháng)。細胞經(jīng)過(guò)融合過(guò)程以后，將單個(gè)融合細胞雜交瘤放在微量滴定板的加樣孔中，逐孔檢測其分泌產(chǎn)生抗體的能力，以確定能產(chǎn)生實(shí)驗目標的抗體的雜交瘤細胞。一旦確定雜交瘤細胞以后，它們或被放在HAT培養基中培養或被注射到小鼠體內，作為鼠骨髓腫瘤而永久保存，也可以將它們冷凍，待用時(shí)再解凍，重新培養或注射到小鼠體內。 
（二）單克隆抗體的應用 
    單克隆抗體稱(chēng)為第三代抗體，被譽(yù)為“免疫學(xué)中的技術(shù)革命”，已被廣泛應用于許多領(lǐng)域，并已取得令人矚目的成果。在科研和藥學(xué)研究中，它是重要的研究試劑，可以用來(lái)識別、檢測和分離外來(lái)的抗原；在疾病的臨床診斷中，它是非常靈敏的鑒定方法，常用于各種傳染病的臨床診斷，如乙型肝炎、衣原體疾病等的診斷；在疾病治療中，它是有力的治療武器，已被制成“藥物導彈”，成功應用于某些腫瘤疾病的治療，或大大降低毒素對正常細胞的傷害。目前 已制成了針對淋巴瘤、肝癌、結腸癌、乳腺癌和骨癌等10余種癌癥的單克隆抗體。 

 

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