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一、試驗用途及原理：
用于沙門(mén)氏菌和志賀氏菌、霍亂弧菌生化鑒定。
細菌分解乳糖依靠?jì)煞N酶的作用，一種是β-半乳糖苷酶滲透酶，它位于細胞膜上，可送乳糖分子滲入細胞，另一種β-半乳糖苷酶，亦稱(chēng)乳糖酶，位于細胞內，能使乳糖水解成半乳糖和葡萄糖。
具有上述兩種酶的細菌，能在24-48h發(fā)酵乳糖，而缺乏此兩種酶的細菌，不能分解乳糖。乳糖遲緩發(fā)酵菌只有β-半乳糖苷酶而缺乏β-半乳糖苷滲透酶，因而乳糖進(jìn)入細胞很慢，需經(jīng)培養基中1%乳糖較長(cháng)時(shí)間的誘導，產(chǎn)生相當數量的滲透酶后，才能較快分解乳糖，故呈遲緩發(fā)酵現象。
ONPG可迅速進(jìn)入細菌細胞，被β-半乳糖苷酶水解，釋放出黃色的臨位硝基苯酚，故由培養液變黃可迅速測知β-半乳糖苷酶的存在，從而確定該菌為乳糖遲緩發(fā)酵菌。
二、培養基配方（g/L）：
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1%蛋白胨水 |
750mL |
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ONPG |
1.5g |
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磷酸鹽緩沖液 |
250mL |
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pH 7.5 25℃ |
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三、試驗方法：
1. 將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯中或采用其他制備方法，制成5 McFarland濁度（約109CFU/ml）的菌懸液。
2. 吸取0.05-0.08ml（約1-2滴）至生化管內，36±1℃培養24h后，觀(guān)察實(shí)驗結果。
四、結果觀(guān)察與解釋
接種以下質(zhì)控菌株，36±1℃培養24h：
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質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
生長(cháng)情況 |
其他特征 |
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大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
+++ |
陽(yáng)性，培養基變深黃色 |
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霍亂弧菌 |
/ |
+++ |
陽(yáng)性，培養基變深黃色 |
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福氏志賀氏菌 |
CMCC(B)51572 |
+++ |
陰性，培養基無(wú)色 |
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宋內志賀氏菌 |
CMCC51592 |
+++ |
陽(yáng)性，培養基變深黃色 |
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痢疾志賀氏菌 |
CMCC51252 |
+++ |
陰性，培養基無(wú)色 |
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肺炎克雷伯氏菌 |
CMCC46117 |
+++ |
陽(yáng)性，培養基變深黃色 |
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傷寒沙門(mén)氏菌 |
CMCC(B)50071 |
+++ |
陰性，培養基無(wú)色 |
圖1-1 ONPG生化管質(zhì)控結果
五、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分，需做其他補充試驗。
相關(guān)產(chǎn)品：
注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。
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