消毒劑的使用驗證方法

  使用化學(xué)消毒劑的目的是將環(huán)境中的微生物殺滅或降低其在環(huán)境中的污染程度。因此在長(cháng)期使用化學(xué)消毒劑時(shí)，應制定清潔和滅菌的標準操作規程，并定期進(jìn)行驗證，以確證清潔與滅菌的有效性。由于消毒劑的殺菌結果會(huì )受到被消毒表面的類(lèi)型與被消毒物的接觸時(shí)間以及相關(guān)設施中的微生物種群影響，每個(gè)使用者都應對消毒劑在不同的使用條件下的消毒效果進(jìn)行評價(jià)。

  1. 驗證前的考慮因素

  a) 基于消毒劑本身的消毒能力進(jìn)行設計及評價(jià)；

  b) 基于生產(chǎn)和實(shí)驗室環(huán)境生物真實(shí)負載進(jìn)行設計及評價(jià)；

  c)驗證內容應包括消毒條件、方法、所用介質(zhì)、消毒劑濃度、消毒時(shí)間、消毒劑的交替使用等;

  d)選擇合適的試驗方案；

  e)所有的規程、方法和結果均要形成文件，以提供一個(gè)完整的驗證項目的永久性書(shū)面記錄。

  2.制定驗證方案

  驗證方案應闡明驗證的目的、驗證的內容和原因；應詳盡把整個(gè)驗證的每一個(gè)部分落實(shí)到具體的部門(mén)和個(gè)人；應說(shuō)明取樣方法（包括取樣數證和取祥點(diǎn)）以及測試方法；“合格標準”必須有限定范圍，包括如結果超越限度時(shí)如何進(jìn)行調查和糾正的方法。

  3.空氣消毒效果的微生物監測

  (1)采樣時(shí)間

  在消毒處理后、操作前進(jìn)行。

  (2)采樣方法

  采樣前．關(guān)好門(mén)窗．在尤人走動(dòng)的情況下．靜止10min進(jìn)行采祥。室內面積≤30m²．對角線(xiàn)內、中、外設3點(diǎn)，內、外點(diǎn)布點(diǎn)部位距墻壁1m處；室內而積＞30m²，設4角及中央5點(diǎn)、4角的布點(diǎn)部位距墻壁1m處。

將營(yíng)養瓊脂平板(9cm)放在室內各采樣點(diǎn)處．采祥竊度為距地而0. 8m~1.5m。采樣時(shí)．將平板蓋打開(kāi)，暴露5min．蓋好平板．將平板賞于36°C士1°C恒溫箱培養48h，計數菌落數．并分離致病菌。

  (3)檢測方法: 平板暴露法

  (4)結果計算見(jiàn)式(5-1):

  式中：

  A——平板面積，cm²；

  T——平板暴露時(shí)間，min；

  N——平均菌落數，CFU/平皿；

  (5)結果判定

  參見(jiàn) GB15982一2012《醫院消毒衛生標準》和 WS/T367—2012《醫療機構消毒技術(shù)規范》Ⅰ類(lèi)區域：細菌總數􀀴10CFU/m³，并且未檢出致病菌為消毒合格；Ⅱ類(lèi)區域：細菌總數 􀀴200CFU/m³，并且未檢出致病菌為消毒合格；Ⅲ類(lèi)區域：細菌總數􀀴500CFU/m³，并且未檢出致病菌為消毒合格。

  4.手和皮膚黏膜消毒效果監測

  (1)采樣時(shí)間

  在消毒后立即采樣。

  (2)采樣方法

  ①手的采祥：被檢人五指并攏．用沒(méi)有含相應中合劑的無(wú)菌洗脫液的棉拭子在雙手指屈面從指根到指端往返涂擦2次（一只手涂擦面積約30cm²，并隨之轉動(dòng)采樣棉拭子，剪去操作者手接觸部位，將棉拭子投入10mL含相應中合劑的無(wú)菌洗脫液試管內，立即送檢。

  ②皮膚黏膜采樣：用5cmX5cm的標準滅菌規格板，放在被檢皮膚處．用浸有含相應中 合劑的無(wú)菌洗脫液的棉拭子1支，在規格板內橫豎往返涂擦各5次，并隨之轉動(dòng)棉拭子，剪 去操作者手接觸部位，將棉拭子投入10mL含相應中合劑的無(wú)菌洗脫液試管內，立即送檢。 不規則的黏膜皮膚處可用棉拭子直接涂擦采樣。若表面不足5cmX5cm，可用相應面積的規格板采樣。

  (3)檢測方法

  ①細菌菌落總數檢測：將采樣管在混勻搖上振蕩20s或用力振打80次，用無(wú)菌吸管吸取1.0mL待檢樣品接種于滅菌平皿．每一樣本接種2個(gè)平皿，加入已熔化的45℃~48℃的營(yíng)養瓊脂15mL~18mL．混勻后，于36℃±1℃培養48h，計數菌落數。結果計算方法見(jiàn)式(5-2)。

  ②致病菌檢測：金黃色葡萄球菌、沙門(mén)氏菌和溶血性鏈球菌按相關(guān)標準執行。

  (4)結果判定

  菌落總數≤CFU/m²并未檢出致病菌為消毒合格。

  5.物品和環(huán)境表面消毒效果的監測

  (1)采祥時(shí)間

  在消毒后4h內進(jìn)行采樣。

  (2)采樣面積

  被采表面<100cm²，取全部表面；被采表面≤100cm²，取100cm²。

  (3)采樣方法

  用10cmX10cm的標準滅菌規格板．放在被檢物體表面，用沒(méi)有含相應中合劑的無(wú)菌洗脫液的棉拭子1支，在規格板內橫豎往返涂擦各5次．并隨之轉動(dòng)棉拭子，剪去操作者手接觸部位，將棉拭子投入10mL含相應中合劑的無(wú)菌洗脫液試管內，立即送檢。 不規則的物體表面可用棉拭子直接涂擦采樣。

  (4)檢測方法

  ①細菌菌落總數檢測：按“手和皮膚黏膜消毒效果監測”執行；

  ②致病菌檢測：金黃色葡萄球菌、沙門(mén)氏菌和溶血性鏈球菌按相關(guān)標準執行。

  (5)結果判定

  菌落總數≤5CFU/m²，并未檢出致病菌為消毒合格。

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