可溶性抗原(如細菌浸出液、外毒素、組織浸 出液、動(dòng)物血清等 )與相應的抗體發(fā)生結合,在 電解質(zhì)的參與下,經(jīng)過(guò)一定時(shí)間形成 肉眼可見(jiàn)的沉淀物,稱(chēng)為沉淀反應。反應中的抗原稱(chēng)為沉淀原,抗體稱(chēng)為沉淀素。
(1)環(huán)狀沉淀反應 .
在小口徑試管(內徑2—3mm)內,先加入含已知抗體的血清,然后沿管壁徐徐加入待檢抗原,使之重疊于血清上面(勿使兩者混合)。靜置于室溫數分鐘后,兩層液面交界處出現乳 白色沉淀環(huán),為陽(yáng)性反應。
此法比較簡(jiǎn)便、敏感,可用于檢查未知抗原,如檢測炭疽桿菌 的耐熱多糖類(lèi)抗(ASCOLI氏試驗)、血跡來(lái)源等。
(2)絮狀沉淀反應
將抗原和相應抗體在試管中或凹玻片上混勻,出現肉眼可見(jiàn)的絮狀沉淀顆粒,為陽(yáng)性反應,如輔助診斷由螺旋體引起的梅毒病的康氏反應。
(3)瓊脂擴散反應
可溶性抗原和抗體在半固體瓊脂內擴散,進(jìn)行沉淀反應,稱(chēng)瓊脂擴散反應。瓊脂擴散可分為單向瓊脂擴散和雙向瓊脂擴散兩種類(lèi)型。
①單向瓊脂擴散——將一定濃度的抗體與半固體瓊脂混合,傾注于平皿或玻片上。 凝固后,在瓊脂層打孔,再將抗原加入孔中,使其向四周擴散,一定時(shí)間后在比例適當處形成肉眼可見(jiàn)的環(huán)狀沉淀線(xiàn)。
該反應也可在試管內進(jìn)行。
②雙向瓊脂擴散——將半固體瓊脂傾注于平皿或玻片上。待凝固后,在瓊脂上按一定距離打數個(gè)孔,然后將抗原與抗體分別注入小孔內,兩者互相呈放射狀擴散。一定時(shí)間后,相應的抗原抗體在濃度最適當的地方出現白色沉淀線(xiàn)。
該反應也可在試管中進(jìn)行。但要注意的是,半固體瓊脂要放在抗體與抗原之間。
瓊脂擴散反應和電泳技術(shù)結合起來(lái),進(jìn)一步發(fā)展為免疫電泳技術(shù)。免疫電泳技術(shù)由于具體操作的不同,又可分成許多種方法,如對流免疫電泳、“火箭”免疫電泳、抗原一 抗體交叉免疫電泳等。
瓊脂擴散反應在實(shí)踐中應用很廣,主要用于抗原抗體成分的研究、生物制品的純度分析、某些疾病的臨床診斷。
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