ISO 6887-5《微生物檢驗用測試樣品,初始稀釋液和十倍稀釋液的制備第5部分:乳及乳制品制備的特殊要求》中另有一些制備要求如下:
1)酸性乳制品檢測時(shí)應確保將懸浮液的pH值調節回中性,建議在稀釋液中加入pH指示劑,以避免滅菌pH探針的使用。如有需要,應添加NaOH溶液直至指示劑變色。當使用緩沖稀釋液時(shí),通常須添加NaOH溶液以增進(jìn)堿性成分的緩沖容量。NaOH溶液的濃度取決于待測產(chǎn)品的酸度,最適宜的濃度(如0.1mol/L或1mol/L)是與稀釋液仍接近1∶9比率的濃度。
2)高脂肪含量(>20%)的乳制品檢測時(shí)需在稀釋液中添加1g/L~10g/L的乳化劑.如吐溫80等。添加量根據脂含量水平而定﹐例如脂含量40%的添加4g/L乳化劑。
3)幾種特定乳制品:
① 黃油,稱(chēng)取10g的試料置于一無(wú)菌容器內,將容器放入45℃水浴中,直至試料完全融化。加入預熱至45℃的 90mL通用稀釋液進(jìn)行混合,建議使用蠕動(dòng)式均質(zhì)器。
若檢測方法中要求僅使用稀釋液的水相部分。則應稱(chēng)取50g的黃油試料 (其中水的體積/質(zhì)量百分數為W%),加入預熱至45℃的稀釋液,加入量為[50-(50×w%)]mL這時(shí),稀釋液水相的1mL即相當于1g黃油。例如:50g黃油,含水的體積/質(zhì)量百分數為16%,即8mL, 應加入[50-(50×16%)]=42ml的稀釋液,水浴融化試料后,取出并振搖混合,靜置分層不要超過(guò)15min,必要時(shí)用刮刀或玻璃棒除去脂肪層。如有必要分離油、水相,則將融化的試料轉移到無(wú)菌離心管中(或者直接在離心管中融化),離心后去除脂肪層,用吸管吸取底層的水相,1mL即相當于1g黃油。
② 冰淇淋稱(chēng)取10g試料至燒瓶或無(wú)菌均質(zhì)袋,加入90ml室溫的通用稀釋液并混勻,期間試料會(huì )融化。
③ 蛋黃醬、甜點(diǎn)和甜乳酪(pH>5)稱(chēng)取10g試料至含玻璃珠的燒瓶中,加入90mL室溫的通用稀釋液﹐振搖使樣品分散。也可使用蠕動(dòng)式均質(zhì)器及均質(zhì)袋,則無(wú)需加玻璃珠。
④ 發(fā)酵乳和酸乳酪(pH<5)稱(chēng)取10g試料至含玻璃珠的燒瓶中,加入90mL室溫的pH7.5±0.2的緩沖蛋白胨水或磷酸鹽緩沖液。手搖混合,或使用蠕動(dòng)式均質(zhì)器及均質(zhì)袋,則無(wú)需加玻璃珠。
⑤ 乳基嬰兒食品先反復振搖和翻轉,使密閉容器內容物充分混勻。若試驗樣品在一個(gè)原裝未開(kāi)封容器中太滿(mǎn)而不能充分混勻時(shí),可以將其移出至一個(gè)更大些的容器中進(jìn)行混合。打開(kāi)容器,用刮刀取出規定量的試料,取樣完畢后立即密封容器。
稱(chēng)取10g 試料,加入含通用稀釋液的稀釋瓶中,含淀粉的樣品應使用特定稀釋液;若不易獲得均勻的懸浮液﹐可先將稀釋液預熱至45℃,并預先在稀釋瓶中加人玻璃珠以使樣品更好地溶解復原。若使用了預熱的稀釋液,此附加操作應在報告中提及。為充分溶解樣品,可緩緩渦旋浸濕樣粉,然后手搖樣品瓶約25次,振搖幅度300mm,時(shí)間約7s;或使用蠕動(dòng)式均質(zhì)器。然后將稀釋瓶放置5min,不時(shí)搖動(dòng)。淀粉含量較高的產(chǎn)品在制備初始懸浮液時(shí)可能有黏稠度過(guò)高的問(wèn)題,可采用含α淀粉酶的通用稀釋液來(lái)減少懸浮液的黏稠度,或使用兩倍量的稀釋液進(jìn)行稀釋,但隨后的檢測中要將此稀釋液的濃度計算在內。
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