初級產(chǎn)品階段的微生物樣品采集

  初級產(chǎn)品階段的采樣用于監測動(dòng)物中可能攜帶的人畜共患病原體的傳播途徑,樣本應從動(dòng)物及其環(huán)境中獲取,包括在運輸過(guò)程中和在屠宰場(chǎng)中,此時(shí)采樣計劃(包括方法、數量、重量和體積等),應根據初級產(chǎn)品的性質(zhì)和需要采樣的對象而變化。

① 農場(chǎng)環(huán)境下的采樣

  對消毒后的動(dòng)物房進(jìn)行采樣時(shí),最好在所有表面干燥后再進(jìn)行,以最大限度地減少消毒劑對采集樣品過(guò)程中的干擾。若已知使用的消毒劑,應將適當的中和劑添加到相關(guān)的稀釋劑中。樣品應在采樣當天進(jìn)行培養。

  環(huán)境表面采樣可使用適宜的織物拭子,棉簽等,為了最大限度獲得微生物,拭子棉簽等應盡可能大,擦拭足夠大的面積,以確保所有表面材料都被覆蓋到。

  對各種類(lèi)型的地面,可穿著(zhù)靴襪走動(dòng)采樣。采樣前用飲用水或其他合適的稀釋劑潤濕靴襪。對大空間的代表性區域進(jìn)行采樣時(shí),例如在家禽舍中,每間禽舍至少需要100步,包括房屋的全長(cháng)和寬度﹐以及任何零散或條塊的地區,并確保包括糞便積聚區域或潮濕的垃圾區域。拖拭子可以與靴襪在相同的情況、相同的采樣原則下使用。

  垃圾樣品通常不具有代表性,最好收集一個(gè)大樣本,如從整個(gè)房屋內至少60個(gè)不同的地方收集總量約2kg重的樣品。糞便樣品通�？梢允占�5個(gè)～20個(gè)單獨的糞便﹐也可采集傳送帶﹑禽舍的地板、飼料坡道等處的混合糞便,應確保各處所采集的樣品能代表性反應動(dòng)物群體的狀態(tài)。塵樣可使用手套或合適的無(wú)菌硬刷,刮刀收集,也可使用潮濕的織物拭子從表面收集薄層的灰塵,避免在靠近飼料輸送系統的地方取樣,因為飼料粉塵顆粒在此處的灰塵中積累過(guò)多,不要從最近使用過(guò)的加熱器或燈具上收集灰塵,因為熱量和光線(xiàn)會(huì )降低樣品中細菌的含量。

  采集的水樣應包括水中的沉淀物,還應包括采集自飲水系統的拭子�？蓮溺娦尾刍虿凼斤嬎�系統中舀取沉淀物﹐并使用干的織物拭子在槽與水容器之間的界面周?chē)�擦拭采樣。采集牧�?chǎng)動(dòng)物飲用的天然水源時(shí),樣本最好是河流中緩慢移動(dòng)的水或溪流彎曲處的沉積物和積聚在泉水深層帶中的沉積物。對主要供水管道進(jìn)行采樣時(shí),最好收集較大量的水(如5L～10L) ,或將管道過(guò)濾器留置在供水系統中并定期取出進(jìn)行檢測,或在生物體較易附著(zhù)的水箱中懸放無(wú)菌海綿或棉塞,待1天～2天后取出進(jìn)行培養。

  液體清除系統,如排水溝或水道采樣可采用Moore's排水拭子,將其錨定在排水管或液體廢物處理管道中5天～7天,然后取下進(jìn)行培養。

  對奶牛場(chǎng),牛的健康狀況檢查采樣采用繩拭子,即將無(wú)菌繩索懸掛在飼料和水槽的正上方,牛只會(huì )用它擦拭及咀嚼,從而將細菌轉移到繩索上24h后取下送檢。通常位于擠奶設備和散裝罐之間以除去牛奶中的異物的一次性過(guò)濾器,也可用于農場(chǎng)的微生物狀況和衛生標準評估。

② 對動(dòng)物的采樣

  對農場(chǎng)動(dòng)物采樣通常需要對動(dòng)物進(jìn)行約束,當從動(dòng)物的直腸﹐泄殖腔或鼻拭子采樣時(shí),應注意避免對動(dòng)物造成傷害,同時(shí)最大限度地提高拭子上對樣本采集的采集率。新鮮糞便應從地板或從動(dòng)物的直腸內采取。皮膚,皮毛或羽毛的采樣使用由織物片組成的濕潤的大拭子連續擦拭動(dòng)物的背部或其他受污染區域(每塊拭子至多擦拭5只動(dòng)物)來(lái)獲得。

  對屠宰動(dòng)物的采樣包括直腸內容物、盲腸內容物或完整盲腸(對家禽﹐采集的樣品最好是完整的盲腸;對豬和其他物種,可在盲腸的盲端捆扎并送到實(shí)驗室,或對盲腸外部仔細消毒后現場(chǎng)采集內容物)、腸系膜淋巴結和扁桃體。

③ 孵化場(chǎng)的采樣

  對(禽類(lèi))孵化場(chǎng)的采樣主要檢測目的是沙門(mén)氏菌。對孵化籃內襯采樣盡可能選取面積大的襯墊,總計約1m²。將內襯小心收集到無(wú)菌袋中,并盡可能多地保留其黏附的物質(zhì)。若有蛋殼被壓碎并殘留在內襯時(shí),也應包含在采樣中。盡可能從多的孵化籃內收集孵化后蛋的破殼,將其收集在一個(gè)大袋子內。孵化后殘留的絨毛樣品更具有檢測參考價(jià)值,可使用手套或織物拭子采集孵化場(chǎng)地面上的絨毛,最好收集干燥的,特別是積累在孵化器的空氣提取管中的樣本。

  收集新孵出的幼雛的早期腸道排泄出的胎糞樣本,直到獲得來(lái)自至少250只幼雛的胎糞樣品。最佳樣本數應該不低于300,從而可以可靠地檢測出大于等于1%的胎糞污染。

  對未能孵化的幼雛胚胎采樣,可檢測由母體垂直傳播的沙門(mén)氏菌。由于蛋仍然完好無(wú)損,因此胚胎(蛋)可作為飼養雞群中的沙門(mén)氏菌感染程度的指標。通常,至少需有60個(gè)雞蛋送往實(shí)驗室。從胚胎(蛋)中的內臟和卵黃囊進(jìn)行無(wú)菌采樣并收集。對被淘汰的幼雛,即由于性別或身體缺陷被認為是不適合飼養的活體幼雛采樣,類(lèi)似于死胎樣品的抽樣檢測程序。通常送往實(shí)驗室的幼雛至少60只。

  對送往養殖場(chǎng)的幼雛,采樣應該盡量在幼雛送入禽舍前進(jìn)行,采集放在裝有幼雛盒子底部的墊紙作為樣品。采樣應小心謹慎,盡量減少來(lái)自禽舍或采樣者手部帶來(lái)的污染。每個(gè)樣本群中至少包含5個(gè)幼雛盒的樣品,樣本的總面積至少為1m²,放于無(wú)菌塑料袋中送往實(shí)驗室。

④ 動(dòng)物運輸車(chē)輛、模塊和箱子的采樣

  運輸工具與任何表面一樣,采樣的面積越大,采集和檢測的獨立樣品的數量越多,檢測到目標微生物的可能性就越大。

  對大型動(dòng)物運輸車(chē)輛,大號的手持織物拭子或靴子在適當的環(huán)境情況下可用于對地板表面殘留的糞便進(jìn)行采樣。采樣點(diǎn)應該包括地板所有的主要相關(guān)部分。

  對家禽的運輸條板箱及模塊,在運輸車(chē)輛的板條箱和地板上采集糞便殘留物可用于評估屠宰批次的污染可能性。最好對多個(gè)板條箱的地面進(jìn)行采樣。應注意不同批次之間使用的采樣設備應消毒,避免交叉污染。

  動(dòng)物運輸完成后,相關(guān)車(chē)輛和設備應該立刻進(jìn)行清洗和消毒,可使用手持織物拭子盡可能全面地對車(chē)輛內與動(dòng)物接觸的部分,包括任何通風(fēng)設備進(jìn)行采樣。為評估車(chē)輛仍然攜帶污染的可能,擱腳板﹑輪拱和表面材料均可進(jìn)行采樣。

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