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    霉菌和酵母菌計數檢驗方法-化妝品安全技術(shù)規范(2022年版)



    錄入時(shí)間:2022-11-30 10:32:51 來(lái)源:2022年版化妝品安全技術(shù)規范

    1.范圍

      本規范規定了化妝品中霉菌和酵母菌數的檢驗方法。

      本規范適用于化妝品中霉菌和酵母菌數的測定。


    2.定義

      2.1 霉菌和酵母菌數測定Molds and yeasts count

      化妝品檢樣經(jīng)過(guò)處理,在一定條件下培養后,1g (1mL)檢樣中形成的霉菌和酵母菌總數,藉以判明化妝品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般衛生狀況。

      本方法根據霉菌和酵母菌特有的形態(tài)和培養特性,在虎紅培養基上,置28℃±2℃培養5d,計算所生長(cháng)的霉菌和酵母菌數。


    3.儀器和設備

      3.1 恒溫培養箱:28℃±2℃。

      3.2 振蕩器。

      3.3 三角瓶:250mL。

      3.4 試管:18mm×150mm。

      3.5 滅菌平皿:直徑90mm。

      3.6 滅菌刻度吸管:10mL、1mL。

      3.7 量筒:200mL。

      3.8 酒精燈。

      3.9 高壓滅菌器。

      3.10 恒溫水浴箱。


    4培養基和試劑

      4.1 生理鹽水

      見(jiàn)總則中3.1。

      4.2 虎紅(孟加拉紅)培養基

      成分:
    蛋白胨
    5g

    葡萄糖
    10g

    磷酸二氫鉀
    1g

    硫酸鎂(無(wú)水)
    0.5g

    瓊脂
    20g

    1/3000虎紅溶液(四氯四碘熒光素)
    100mL

    蒸餾水加至
    1000mL

    氯霉素
    100mg
      制法:將上述各成分(除虎紅外)加入蒸餾水中溶解后,再加入虎紅溶液。分裝后,121℃高壓滅菌20min,另用少量乙醇溶解氯霉素,溶解過(guò)濾后加入培養基中,若無(wú)氯霉素,使用時(shí)每1000mL加鏈霉素30mg。


    5操作步驟

      5.1 樣品稀釋

      見(jiàn)菌落總數測定中5.1。

      5.2 取1:10、1:100、1:1000的檢液各2mL,分別注入2個(gè)滅菌平皿內,每皿1mL,注入融化并冷卻至45℃±1℃左右的虎紅培養基,充分搖勻。凝固后,翻轉平板,置28℃±2℃培養5d,觀(guān)察并記錄。另取一個(gè)不加檢液的滅菌空平皿,加入約15mL虎紅培養基,待瓊脂凝固后,翻轉平皿,置28℃±2℃培養箱內培養5d,為空白對照。

      5.3 計算方法:先點(diǎn)計每個(gè)平板上生長(cháng)的霉菌和酵母菌菌落數,求出每個(gè)稀釋度的平均菌落數。判定結果時(shí),應選取菌落數在5CFU~50CFU范圍之內的平皿計數,乘以稀釋倍數后,即為每g(或每mL)檢樣中所含的霉菌和酵母菌數。其他范圍內的菌落數報告應參照菌落總數的報告方法報告之。

      5.4 每g(或每mL)化妝品含霉菌和酵母菌數以CFU/g (mL)表示。

     

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