影響芽孢形成的因素

  芽孢又稱(chēng)內生孢子，是產(chǎn)芽孢細菌在營(yíng)養條件缺乏時(shí)，在菌體內形成的圓形或橢圓形的休眠體。芽孢含水量極低，抗逆性強，能經(jīng)受高溫、紫外線(xiàn)、電離輻射以及多種化學(xué)物質(zhì)滅殺等，在滅菌監測中，可利用芽孢的高抗逆性制備生物指示劑。

  為了試驗和實(shí)際生產(chǎn)的需要，有時(shí)需要培養出大量的芽孢，本文主要談?wù)動(dòng)绊懷挎呱�成的幾個(gè)因素：

一、菌種：

  常見(jiàn)的產(chǎn)芽孢細菌主要為芽孢桿菌屬（Bacillus）、梭狀芽孢桿菌屬（Clostridium）、芽孢乳酸菌屬（Sporolaetobacilbs）等。不同菌種產(chǎn)生的芽孢形態(tài)不盡相同（如圖1），同一菌屬的不同菌株或同一菌種的不同代數，產(chǎn)芽孢能力都會(huì )有所差異，所以在實(shí)踐工作中，為了得到數量較多的芽孢，從根本上篩選出產(chǎn)芽孢能力較強的芽孢菌菌株非常重要。

圖1  不同菌種產(chǎn)生的芽孢形態(tài)

二、營(yíng)養因素：

  芽孢是細菌營(yíng)養體的休眠體，往往在不利于菌體生長(cháng)的環(huán)境中產(chǎn)生。所以為了得到較多數量的芽孢，通常會(huì )選擇營(yíng)養較為貧瘠的培養基，也可選用一些專(zhuān)業(yè)制作的產(chǎn)芽孢培養基，如菌種芽孢培養基（HB8739）、錳鹽營(yíng)養瓊脂（HB4177）等。

三、環(huán)境刺激：

  除營(yíng)養因素外，菌體所處的培養環(huán)境，也會(huì )造成芽孢生成狀況的差異。當遇到干燥、高溫、缺氧或化學(xué)藥品等惡劣環(huán)境時(shí)，會(huì )刺激菌體將身體中的水分幾乎全部脫去，從而使細胞凝聚成橢圓形的芽孢。無(wú)機鹽中磷酸鹽和錳離子是人們通常選用的能有效提高芽孢率的無(wú)機成分。

四、培養時(shí)間：

  細菌在最適宜的時(shí)候產(chǎn)生芽孢一般需數小時(shí)，有人在培養枯草芽孢桿菌時(shí)，曾作過(guò)追蹤觀(guān)察，結果發(fā)現：在接種培養4小時(shí)后即有芽孢生成；以后每隔4小時(shí)觀(guān)察一次，芽孢數均呈比例增長(cháng)；至24小時(shí)約半數產(chǎn)生芽孢；48小時(shí)全部變成芽孢。在培養芽孢的過(guò)程中，要及時(shí)鏡檢監控芽孢的生成情況，并不是培養時(shí)間越長(cháng)，芽孢數量越多。在培養嗜熱脂肪芽孢桿菌的過(guò)程中發(fā)現，當芽孢率達到一定程度后再繼續培養，芽孢量反而會(huì )急劇下降，可能是有些已經(jīng)形成的芽孢二次萌發(fā)所致（如圖2）。

圖2  嗜熱脂肪芽孢桿菌在同一平板上培養不同時(shí)間的芽孢率

五、討論：

  芽孢的生成受到菌種、營(yíng)養、環(huán)境等諸多條件的影響，營(yíng)養成分的多少、水分和溫度的高低、刺激因素的引入都需要充分考慮，進(jìn)行反復試驗才能得出可靠的組合；培養過(guò)程中還需要及時(shí)監控芽孢率，在芽孢量最多的時(shí)候及時(shí)進(jìn)行收集，避免前功盡棄。

相關(guān)產(chǎn)品：

菌種芽孢培養基-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情

錳鹽營(yíng)養瓊脂-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情

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