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一、氫氧化細菌和鐵載體的簡(jiǎn)介：
氫氧化細菌（Hydrogen-oxidizing bacteria）是一類(lèi)能通過(guò)氧化氫氣獲得能量，固定二氧化碳作為唯一碳源的微生物，土壤中分布廣泛，尤其是豆科植物根際大量存在。氫氧化細菌沒(méi)有單獨的分類(lèi)，多分布在假單胞菌屬、副球菌屬、黃桿菌屬、分支桿菌屬、產(chǎn)堿菌屬、諾卡氏菌屬、醋酸桿菌屬及棒桿菌屬等。絕大部分氫氧化細菌是兼性化能自養型，它們可以自養生長(cháng)、異養生長(cháng)、甚至混合營(yíng)養生長(cháng)，好氧或兼性厭氧。氫氧化細菌屬于植物根際促生菌，在農作物增產(chǎn)方面有巨大的應用潛力，所以其各種促生機制的研究已成為熱點(diǎn)，其中分泌鐵載體就是幾種重要的促生機制之一。
鐵載體（siderophore）是一類(lèi)能特異性結合鐵離子并供給微生物細胞的低分子量物質(zhì)。鐵元素是微生物生長(cháng)的必需元素，在缺鐵的環(huán)境中微生物會(huì )分泌鐵載體螯合鐵離子滿(mǎn)足自身生長(cháng)需要。目前，常用的鐵載體檢測方法為Schwyn和Neilands發(fā)明的通用CAS瓊脂平板法，當細菌產(chǎn)生的鐵載體與由鉻天青S（CAS）、十六烷基三甲基溴化銨（HDTMA）、鐵離子組成的藍色復合物結合后，會(huì )奪走鐵離子，使細菌周?chē)呐囵B基顏色由藍色變?yōu)殚冱S色，出現鐵載體分泌圈，有利于判斷細菌是否產(chǎn)生鐵載體。
二、CAS檢測培養基
1. 產(chǎn)品用途：用于細菌鐵載體篩選試驗。
2. 配方（mg/L）：
|
鉻天青S（CAS） |
60.5 |
|
十六烷基三甲基溴化銨（HDTMA） |
72.9 |
|
六水氯化鐵 |
2.645 |
|
二水磷酸二氫鈉 |
295.25 |
|
十二水磷酸氫二鈉 |
1213.5 |
|
氯化銨 |
125 |
|
磷酸二氫鉀 |
37.5 |
|
氯化鈉 |
62.5 |
|
瓊脂 |
9000 |
|
pH值6.8±0.1（25℃） |
|
三、試驗方法：
1. 稱(chēng)取本品10.87g，加熱煮沸完全溶解于1000mL蒸餾水中，分裝三角瓶，116℃高壓滅菌30分鐘，冷卻至50℃時(shí)，傾入無(wú)菌平皿，備用；
2. 用接種環(huán)挑取質(zhì)控菌株新鮮培養物點(diǎn)種到平板上；
3. 放置35℃需氧培養24小時(shí)，記錄試驗結果。
四、試驗結果判斷：
接種以下質(zhì)控菌株，放置于35℃需氧培養24小時(shí)。
|
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量（CFU） |
參比或計數培養基 |
質(zhì)控結果 |
|
銅綠假單胞菌 |
ATCC 9027 |
/ |
/ |
菌落周?chē)悬S色環(huán) |
圖1 銅綠假單胞菌ATCC 9027在CAS檢測培養基菌落特征
相關(guān)產(chǎn)品：
注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。
