TTC添加的注意事項

  TTC:俗稱(chēng)紅四氮唑，學(xué)名2,3,5-三苯基氯化四氮唑，化學(xué)式如下：

  在菌落總數的檢測時(shí)，經(jīng)常添加這種物質(zhì)，可以起到兩方面的作用：

  其一，可以使菌落顯紅色，便于區分菌落和雜質(zhì)，更利于計數；

  其二，可以有效的防止平板上的菌落蔓延情況。

  這兩種作用的原理是不同的，TTC溶于水是無(wú)色的，而嗜中溫性需氧菌在新陳代謝過(guò)程中產(chǎn)生的琥珀脫氫酶可以使無(wú)色的TTC被還原成紅色的TPF，使菌落顯色，這是顯色的原理；同時(shí)TTC還具有抑制某些革蘭氏陽(yáng)性菌生長(cháng)的作用，因此會(huì )防止菌落蔓延。但既然會(huì )抑制細菌的生長(cháng)，那會(huì )不會(huì )造成檢測誤差呢？其實(shí)只要合理使用，注意添加量，對檢測結果的影響并不是很大，是可以忽略不計的。

  有專(zhuān)家對此做過(guò)實(shí)驗，實(shí)驗結果表明培養基內TTC濃度在0.0003%-0.001%（w/v）的范圍內對菌落生長(cháng)抑制作用不顯著(zhù)，但濃度太低菌落的顯色效果并不是很好，因此推薦大家按照TTC濃度為0.0005%的量來(lái)添加就不會(huì )對檢測結果產(chǎn)生較大影響，還會(huì )使菌落顯色方便計數。為了方便大家在檢測過(guò)程中方便添加，小編特意做了一個(gè)表格，方便大家查詢(xún)：

  除了添加量之外，在使用我們還應該TTC過(guò)程中我們還應該注意些什么呢？

  要點(diǎn)一：TTC的配制過(guò)程，一定要在無(wú)菌條件下進(jìn)行。因為我們配制好的TTC溶液在檢測時(shí)是直接加入到培養基中的，必須保證TTC溶液時(shí)無(wú)菌的，配制用水也必須是無(wú)菌水。

  要點(diǎn)二：TTC具有比較強的光敏性，見(jiàn)光易分解，因此無(wú)論是TTC粉末還是配制好的TTC溶液都要注意避光冷藏保存，配制好的溶液一定要放在棕色的試劑瓶里。

  要點(diǎn)三：TTC溶液要在檢測過(guò)程中直接加入滅菌完的培養基中，即在傾倒平皿之前加入培養基然后搖勻使用。盡量不要將TTC溶液加入培養基后一起滅菌，這樣操作會(huì )使培養基顏色加深，不利于顯色和計數。

  要點(diǎn)四：若顯色效果不是很好，可以考慮提高一下TTC濃度，但不要超過(guò)0.001%的濃度，否則會(huì )使檢測結果出現比較大的偏差。

  要點(diǎn)五：加TTC溶液還可以有效的控制平板上的菌落蔓延情況，若是添加試劑的主要目的是為了控制菌落蔓延，建議增加培養基中TTC的濃度，濃度大約0.0008%時(shí)就會(huì )起到比較好的效果，并且不會(huì )影響結果。

  任何方法都會(huì )是雙刃劍，添加TTC顯色當然也是如此，添加TTC最主要的問(wèn)題就是它的抑菌作用，會(huì )造成檢測結果偏低，因此很多人不愿使用。其實(shí)若是不存在雜質(zhì)干擾或者一些特殊情況可以比較精確的計數，小編也建議大家不要一昧因為顯色之后容易計數就進(jìn)行添加，畢竟這只是在一些特殊情況下采用的非常規手段。

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