如何判斷一個(gè)培養基的穩定性及進(jìn)行保存

  在平常的實(shí)驗中，我們經(jīng)常會(huì )遇到一個(gè)情況：配制了200mL培養基，實(shí)際上只用了50mL培養基，那剩下的培養基是否能下次使用？或者應該保存在什么條件下可下次繼續使用？主要從以下兩個(gè)方面判斷：

  （1）污染的可能性。主要考慮使用過(guò)程和保存過(guò)程綜合考量是否有較大的污染可能性，若存在污染風(fēng)險，不建議繼續留用。（注：培養基不可重復滅菌）

  （2）培養基成分的穩定性。根據培養基的組分穩定性，也可大致判斷培養基是否易于長(cháng)時(shí)間或短時(shí)間儲存。

  注：嚴格來(lái)講，培養基的儲存條件及時(shí)間應由相應的效期試驗得出，本文章的方法僅用于大致判斷培養基的穩定性。

一、培養基中較穩定成分

  （1）穩定的無(wú)機鹽（不參與氧化還原反應）：如磷酸鹽、氯化鈉、氯化鉀等，對光熱不敏感，通常也不與其他成分發(fā)生氧化還原反應，在培養基的長(cháng)期存放過(guò)程中不會(huì )發(fā)生變化。

  （2）瓊脂：瓊脂在中性常溫環(huán)境下較為穩定，在培養基中僅做為凝固劑，因此在適宜的保存條件下，瓊脂通常也不會(huì )發(fā)生明顯變化。

  注：酸性條件和結冰會(huì )破壞瓊脂結構，若培養基長(cháng)期保存過(guò)程中未密封，則瓊脂會(huì )逐漸失水變干。

二、相對穩定的成分

  （1）蛋白胨、酵母浸粉、牛肉浸粉等營(yíng)養成分：這些營(yíng)養成分提供微生物生長(cháng)所需的碳氮源、維生素等，可耐短時(shí)間的高溫滅菌，相對較為穩定。但內含的維生素在長(cháng)時(shí)間的高溫和見(jiàn)光條件下仍然會(huì )逐漸分解，短期內（不超過(guò)1個(gè)月）的室溫保存通常不會(huì )有問(wèn)題，若需要長(cháng)期保存，應放置陰涼處或冷藏避光保存。

  （2）糖醇苷類(lèi)：在培養基中主要提供碳源，種類(lèi)繁多，有一些相對穩定，但在高溫滅菌后，會(huì )逐漸發(fā)生焦化現象，導致培養基pH下降。在培養基含糖量不高于5g/L的情況下，短時(shí)間內通常不會(huì )有明顯變化，若培養基同時(shí)含有磷酸鹽穩定培養基的pH，則更有利于培養基的長(cháng)期存放。

三、不穩定成分

  （1）抗生素類(lèi)：有些抗生素不耐高溫，配制時(shí)只能過(guò)濾除菌，對光和熱敏感，但也有一些抗生素非常穩定，如氯霉素、萘啶酮酸等，在高溫下不分解。含有抗生素類(lèi)的培養基通常應保存在2-8℃。

  （2）天然成分：如卵黃、血液、血清等不穩定成分，通常需現配現用，短期保存需放置在2-8℃，不建議長(cháng)期保存。

  （3）氧化還原性成分：如亞鐵離子、半胱氨酸、巰基乙醇酸鈉等，易被空氣氧化，需密閉保存。

  （4）染料/酸堿指示劑：帶顏色的染料通常對光比較敏感，見(jiàn)光易褪色，應注意避光保存。

  （5）不穩定的鹽：如亞硒酸氫鈉、亞硫酸鈉、碳酸氫鈉等，易分解或被氧化還原等，含此類(lèi)成分的培養基應現配現用或冷藏保存。

總結：

  若培養基中的成分相對比較穩定，可在室溫短期存儲或冷藏長(cháng)期儲存；

  若培養基中含有不穩定成分，應現配現用或在2-8℃短期存儲。

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