【原理】
本培養基是以Lombard-Dowell (LD)培養基為基礎加入厭氧菌選擇性的抗生素配制而成。LD培養基的特點(diǎn)是不用硫乙醇酸鈉而用亞硫酸鈉及半胱氨酸作還原劑,不加葡萄糖以消除對某些厭氧菌的致死效應;此外,蛋白胨含量少可減少氨基酸產(chǎn)生的堿性產(chǎn)物;因此,適宜于絕大多數厭氧菌生長(cháng),一管中加入的慶大霉素不受高壓滅菌影響,在培養基中比較穩定,可抑制絕大多數需氧與兼性厭氧菌;少量的青霉素可抑制芽孢梭菌生長(cháng)。第1管培養基在于分離培養臨床標本中最常見(jiàn)的擬桿菌。另一管中含新霉素,在于分離各種厭氧菌,但要注意對某些菌無(wú)抑制力。
【成分】
胰胨
5g
酵母浸膏
5g
氯化鈉
2.5g
L色氨酸
0.2g
亞硫酸鈉
0.1g
蒸餾水
1000ml
L半胱氨酸鹽酸鹽
0.4g
1%氯化血紅蛋白
1ml
1%維生素K1酒精溶液
1ml
瓊脂粉
0.7g
【制法】
先將蒸餾水中的基礎成分加熱溶解,再加入溶于5ml的1mol/L NaOH 的0.4g, L半胱氨酸鹽酸鹽、1.0ml1%氯化血紅蛋白溶液(1g溶于1mol/L NaOH20ml,加蒸餾水至100ml)等,加熱溶解,調至pH7.5,121℃滅菌15分鐘,分成兩份,分別加入抗生素,分裝成7ml/管。拔去棉塞,蓋上青霉系小瓶上滅菌的膠帽,趁熱套上小號賽珞羅膠帽待干燥包封,貯冰箱內保存備用。
【用途】
用作分離培養厭氧細菌。培養基使用前置沸水浴內10分鐘去氧(當天制作則不必),冷至室溫。用75%乙醇消毒管帽,標本用帶7號長(cháng)針的結核菌素射器每管注入0.2ml左右。垂直置35℃溫箱培養,每天肉眼檢查1次,至第4天不見(jiàn)生長(cháng)菌落報告陰性結果。如見(jiàn)生長(cháng),涂片染色鏡檢,再做耐氧試驗等。
【注意事項】
一般情況下,第1管中生長(cháng)的革蘭氏陰性多形性桿菌可報告為擬桿菌,第2管中除了能生長(cháng)擬桿菌外,其它厭氧菌也能生長(cháng)。見(jiàn)到厭氧生長(cháng)的菌落,要綜合菌形、產(chǎn)氣、動(dòng)力、觸酶試驗以及在兩管培養基中對抗生素的敏感性等進(jìn)行分析判定結果。此種培養基培養法不需要特殊的厭氧培養設備,具有簡(jiǎn)便快速節省等優(yōu)點(diǎn),適合于一般實(shí)驗室使用。
(大連解放軍210醫院 林聽(tīng)寶供稿)
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