一、原理
用MH肉湯將抗菌藥物進(jìn)行一系列稀釋后,定量接種待檢菌,培養后進(jìn)行觀(guān)察,抑制待檢菌肉眼可見(jiàn)生長(cháng)的最低藥物濃度,即為該藥物對待檢菌的最低抑菌濃度(MIC)。該結果對于臨床上的細菌感染治療或動(dòng)物感染治療具有重要的指導意義。
二、操作方法
1.澄清MH肉湯培養基干粉21g,加熱溶解于1000mL純化水中,分裝至小試管,第一管分裝4mL,后面每管分裝2mL,121℃滅菌15min。也可先將培養基滅菌,后分裝于無(wú)菌試管。
2.將試管進(jìn)行編號,在第一支管中加入相應的抗菌藥物,使抗菌藥物濃度為128mg/L,混合均勻,吸取2mL加入至第二支試管中混合均勻,再吸取2mL加入至第三支試管中混合均勻,依次操作至第十三支試管,將第十三支試管吸取2mL舍去,此時(shí)第1-13管的藥物濃度依次為128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125mg/L(也可根據實(shí)際情況改變藥物濃度或增加稀釋度),第14和15支試管不含抗菌藥物。
3.將活化好的待測菌株用生理鹽水制成含菌量為107CFU/mL的菌懸液,向第1-14支試管中分別加入0.1mL菌懸液,置35-37℃培養18-24h(或其他適宜的生長(cháng)條件),觀(guān)察生長(cháng)情況。
三、生長(cháng)現象
以野生分離到的一株大腸桿菌為例,測試多粘菌素B對該菌的最低抑菌濃度,結果如下圖,第1-9支試管澄清,第10支試管開(kāi)始有明顯渾濁生長(cháng),說(shuō)明多粘菌素B對該大腸桿菌的最低抑菌濃度為0.5mg/L。
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