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    改進(jìn)的細菌L型培養基



    錄入時(shí)間:2022-4-7 15:37:35 來(lái)源:現代微生物培養基和試劑手冊

    【原理】

      由于L型細菌細胞壁的缺損,常呈多型性,可因水內滲引起細胞膨脹破裂而死亡,為此L型菌必須在高滲透壓培養基內才能存活,因而在培養基配制時(shí),滲透壓穩定劑起重要作用。以前選用的滲透壓穩定劑多是蔗糖或NaCI。本培養基選用NH4Cl作為滲透壓穩定劑,并制成軟瓊脂,使細菌深入培養基內生長(cháng),因此菌落出現早,存活時(shí)間長(cháng)(20天以上)。


    【成分】

    水解乳蛋白
    10g
    䏡胨
    10g
    磷酸氫二鈉
    0.2g
    氯化銨
    3.4g
    葡萄糖
    0.2g
    瓊脂
    0.8~1g
    牛肉浸液
    100ml
    滅活人血漿或馬血清
    10~20ml

    【制法】

      (1)先將肉浸液調至pH8.0,115℃滅菌10分鐘后,用濾紙過(guò)濾除去沉淀物;

      (2)血漿除外,其它成分按量加于過(guò)濾后的肉浸液中,溶化后,調至pH7.4~7.6;

      (3)定量分裝,115℃滅菌10分鐘后,備用;

      (4)使用前,將溶化瓊脂冷至56℃,加入血漿或馬血清,混勻后,倒入無(wú)菌平皿內,凝固后,待用。


    【用途】

      主要用于L型細菌的培養和分離。如在本培養基內加1.25%的甘氨酸可誘導出乙型鏈球菌L型。

      分離臨床標本中L型細菌時(shí),可將抗菌素加入培養基內接種培養,一般接種后培養20~24小時(shí),出現肉眼可見(jiàn)菌落。誘導L型可用紙片法(制作方法同藥敏紙片),將誘導劑加入培養內亦可作傳代用。


    【注意事項】

      誘導劑可根據細菌的種類(lèi)選擇不同的誘導劑,例如誘導金葡菌L型,用青霉素鉀鹽,每紙片含量20u,200u,每個(gè)平皿各貼一個(gè)紙片,放濕盒內,37℃培養,每天觀(guān)察。在抑菌圈內有很小的菌落出現時(shí),在顯微鏡下觀(guān)察(放大40~100倍),菌落呈油煎蛋樣,即為L型菌落,標明位置,同瓊脂一起挖出,于含青霉素傳代培養基內傳代。

    (山東醫科大學(xué)微生物學(xué)教研組 修玉珍供稿)

     

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