橋壩式選擇培養基

【原理】

  本培養基為一復合培養基。亞碲酸鉀胰蛋白䏡基礎瓊脂平皿中含0.05％的亞啼酸鉀以抑制革蘭氏陰性細菌的生長(cháng)；硫氰酸鉀液體及半固體培養基中含有0.375％的硫氰酸鉀，有抑制革蘭陰性細菌及部分革蘭氏陽(yáng)性細菌的作用。濾紙條橋與半固體壩可讓有動(dòng)力的單核球增多性李斯特氏菌(Listerid monocytogenes)通過(guò)而阻止無(wú)動(dòng)力的雜菌通過(guò)，因此本培養基具有高度選擇性。單核球增多性李斯特氏菌在本瓊脂平皿培養基上生長(cháng)成黑色小菌落。

【成分】

  1.亞啼酸鉀胰蛋白䏡基礎瓊脂平皿培養基（每升蒸餾水中的成分）

  2.硫氰酸鉀液體及半固體培養基（每升蒸餾水中的成分）

  1.亞啼酸鉀胰蛋白䏡基礎瓊脂平板：

  將上述成分（除亞啼酸鉀外）懸浮于1000ml蒸餾水內，加熱溶解，調整至pH7.2,121℃滅菌15分鐘，冷至50℃左右，加入無(wú)菌5％亞啼酸鉀水溶液10ml，混勻（最終濃度為0.05%）后，傾注平皿備用。

  2.硫氰酸鉀液體及半固體培養基：

  懸浮上述各成分（除瓊脂粉外)于1000蒸餾水內，加溫使完全溶解，調整至pH7.2.此即為硫氰酸鉀液體培養基。在100ml液體培養基中加入0.35g的瓊脂粉，加溫溶解后即為硫氰酸鉀半固體培養基。兩者均以高壓滅菌（121℃,15分鐘）取出后，半固體培養基置50℃水浴中備用或臨用前在水浴中加溫溶解。

  3.橋壩式選擇培養基：

  取制好的亞啼酸鉀瓊脂平皿培養基，在中間開(kāi)一條寬為4~5mm的直溝，注意在兩端各留0.5cm距離的瓊脂不切去，這樣可保持中溝寬度的穩定。再在無(wú)菌操作下于中溝內滴加在50℃水浴保溫的硫氰酸鉀半固體培養基至滿(mǎn)，以等距離間隔并與中溝垂直放入預先干熱滅菌的1X4(cm）濾紙條3張跨接于溝的兩端作為橋，再將滅菌鋁片框，即取寬度為6mm，長(cháng)的200mm的鋁片條圍成一中空長(cháng)立方形框架，其長(cháng)為90mm（根據培養血的直徑而定），寬4mm，高6mm，接頭處扣，然后將框的上下兩面在細油石平面上磨平，洗凈，滅菌后備用，置于中溝之上并輕壓之。再在框內加入溶解的硫氰酸鉀半固體培養基使與框邊水平，待凝固后輕輕取出鋁片框，兩端與平皿相接處再加溶解的半固體培養基連接并加至壩的同樣高度，此壩把瓊脂平板培養基分隔成兩半，左邊 A 為病料懸液接種端，右邊 B 為分離端。

【用途】

  分離單核球增多性李斯特氏菌用。

【注意事項】

  在制備亞啼酸鉀瓊脂平板時(shí)，亞啼酸鉀不能直接加入培養基中一起滅菌，否則因高熱而使整個(gè)培養基變黑。采用亞啼酸鉀溶液?jiǎn)为毞珠_(kāi)滅菌或過(guò)濾除菌后待培養基冷至50℃左右再加入到培養基中，可避免培養基變黑。

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