7.5%氯化鈉肉湯原理及使用方法

一、試驗原理：

  用于金黃色葡萄球菌的選擇性增菌培養。

  蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源、氮源、維生素和礦物質(zhì)；較高濃度的氯化鈉提供較高的滲透壓，抑制大多數非葡萄球菌的微生物。

二、培養基配方（g/L）：

三、試驗方法：

 1、培養基制備：稱(chēng)取本品90.0g， 加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝三角瓶或試管，121℃高壓滅菌15分鐘，備用。制備好的液態(tài)培養基保存于2-8℃，應避免光線(xiàn)直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處，室溫保存。

 2、制備質(zhì)控菌液。

 3、接種

  3.1混合菌的接種

  在裝有待測培養基的試管中接種10-100CFU的目標菌，并接種1000-5000CFU的非目標菌，接種總量1ml，同時(shí)接種兩個(gè)平行管，混勻。同時(shí)分別將目標菌菌懸液（與試管接種同一稀釋度）和非目標菌菌懸液（比試管接種小10-100倍稀釋度）1ml傾注平板，接種兩個(gè)平板，作接種量計數用，36±1℃培養18-24小時(shí)。

  3.2非目標菌接種

  在裝有待測培養基的試管中接種1000-5000CFU的非目標菌，接種量1ml，同時(shí)接種兩個(gè)平行管，混勻，36±1℃培養18-24小時(shí)。

 4、培養液的接種

  4.1混合菌培養液的接種

  用10μL接種環(huán)取1環(huán)經(jīng)培養后的混合菌培養液，換線(xiàn)接種到Barid-Parker上，每管接種一個(gè)平板，36±1℃培養45-48小時(shí)。

  4.2非目標菌培養液的接種

吸取10μL經(jīng)培養后的非目標菌培養液，均勻涂布接種到TSA上，每管接種一個(gè)平板。也可使用傾注法進(jìn)行接種，36±1℃培養18-24小時(shí)。

 5、記錄實(shí)驗結果

  目標菌在選擇性平板上的菌落應>10CFU，則表示待測液提培養基的生長(cháng)率良好；非目標菌在非選擇性平板上的菌落<100CFU，則表示待測液體培養基的選擇性為良好。

四、結果觀(guān)察與解釋

  接種以下質(zhì)控菌株，放置36±1℃需氧培養18-24小時(shí)：

圖1 7.5%氯化鈉肉湯微生物質(zhì)控結果

備注：a：金黃色葡萄球菌(ATCC25923)，b：金黃色葡萄球菌(ATCC6538)，c：大腸埃希氏菌，d：空白

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