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【原理】
豬肺消化液含有支原體生長(cháng)所需的某些基本營(yíng)養成分，可代替馬丁氏培養基中的豬胃和牛肉浸液；卵黃液與馬血清比較，膽固醇、脂蛋白、磷脂等支原體生長(cháng)促進(jìn)因子含量更高，而蛋白質(zhì)含量甚低，以卵黃液作為支原體培作基的添加成分，具有成本低、取材容易、促進(jìn)生長(cháng)作用更等優(yōu)點(diǎn)，而且用于抗原制備時(shí)還能減少由支體原吸附蛋白質(zhì)產(chǎn)生的抗原的非特異性。
【成分】
豬肺消化液
800ml
卵黃液
100ml
100000u/ml青霉素G
5ml
酵母浸液
100ml
50％葡萄糖
20ml
0.4％酚紅
5ml
【制法】
(1)豬肺消化液的制備：鮮豬肺250g，絞碎后加入蒸餾水1000ml，濃鹽酸2ml，胃蛋白酶2g,56℃水浴15小時(shí)，沸水浴10分鐘終止消化，脫脂棉過(guò)濾，加蛋白10g, Tris 1g，調至pH7.8，沸水浴15分鐘，冷卻后濾紙過(guò)濾，121℃滅菌15分鐘，冷卻后備用；
(2)卵黃液的制備：新鮮雞蛋洗凈蛋殼，75％酒精浸泡15分鐘，無(wú)菌操作取出卵黃，加玻璃珠搖成勻漿，以pH7.8PBS配成20%(V/V）之懸液，8000rpm離心1小時(shí)，取上清液，加青霉素500u/ml，無(wú)菌試驗檢查后分裝備用；
(3)酵母浸液的制備：鮮酵母500g，加蒸餾水1500ml，充分攪拌，80~90℃水浴20分鐘，冷卻后，8000rpm離心20分鐘，取上清液以1mol／L氫氧化鈉調節至pH7.8,再以450nm濾膜除菌過(guò)濾，分裝備用；
(4)上述成分按比例混合，加入其余無(wú)菌添加成分，最終pH7.8。
【用途】
分離各種人支原體及實(shí)驗室制備支原體抗原。
【注意事項】
1.豬肺須優(yōu)質(zhì)、新鮮，雞蛋須新鮮、無(wú)污染。
2.豬肺消化液、卵黃液4℃保存，酵母浸液-20℃保存。
3.用于肺炎支原體培養時(shí)加葡萄糖，而其他人類(lèi)支原體培養改加0.1％精氨酸。
（第二軍醫大學(xué)長(cháng)征醫院 俞康龍供稿）
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