生、死結核菌鑒別染色液

【原理】

  一般認為與結核菌體內的脫氧核糖核酸與可染性有關(guān)。如果將抗酸菌經(jīng)脫氧核酸消化或鹽酸水解,使其喪失對孔雀綠或亞甲蘭的可染性即可染上復紅。分支桿菌對孔雀綠或亞甲蘭的可染性,所以似乎要決定于菌體內脫氧核糖核酸的聚合程度,而一部分染成綠色的細菌,其脫氧核糖核酸在一定程度上失去聚合化,即為死菌。

【成分及制法】

  (1)1%雀綠水溶液(pH4.1);

  (2)1:5石炭酸復紅液(5%石炭酸復紅液1份加水5份);

  (3)8%硝酸水溶液;

  (4)0.1%~0.5%俾斯麥褐水溶液。

【用途】

  用于抗酸菌標本活菌計數。

【染色步驟】 

  取已固定的涂片,滴加溫度在60~65℃的1%孔雀綠染色液數滴,染色5~10分鐘,水洗后滴加1:5石炭酸復紅液染色3~5分鐘,水洗后滴加8%硝酸,脫色30秒,水洗后滴加0.3%俾斯麥褐染色30秒鐘,然后水洗,干后鏡檢�；罹�著(zhù)綠色,死菌著(zhù)紅色。

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