抗酸桿菌熒光染色法染色液

【原理】

  熒光素染色和普通染料染色法主要不同點(diǎn)就是熒光素染色法敏感性高,抗酸分支桿菌能與熒光染料金胺“O”結合,而金胺“O”是一種能產(chǎn)生強熒光的熒光色素,并具有選擇性,結核菌是帶有陰電荷的微生物,而熒光色素金胺“O”是一種含有自由氨基的金黃色堿性染料,它的離子帶有陽(yáng)電荷,因此金胺“O”能和帶陰電荷的抗酸桿菌結合而著(zhù)色,在熒光顯微鏡中的高壓汞燈的紫藍光照射激發(fā)下,使帶金胺“O”染色的結核菌發(fā)出很強的桔黃色熒光,檢查時(shí)用高倍鏡即可查見(jiàn)明亮細菌。

【成分及制法】

  1. 金胺“O”基礎液:取金胺“O”1.0g溶于95%乙醇100ml中,置褐色瓶中可長(cháng)期保存。

  2. 金胺“O”應用液:取上述基礎液10ml加5%石炭酸液90ml,傾入褐色瓶中可保存兩周。

  3. 3%鹽酸酒精脫色劑:取75%酒精97ml加入3ml濃鹽酸。

  4. 酸性復紅溶液:取酸性復紅1.0g加冰醋酸1ml再加蒸餾水500ml。

【用途】

  用于結核標本的快速檢驗和其它抗酸菌的鑒定。

【用途】

  將固定好的涂片加金胺“O”應用液染5分鐘,水洗后加鹽酸酒精脫色20秒鐘,水洗后加酸性復紅復染30秒鐘,然后水洗,自然干后鏡檢。

【注意事項】

  用高倍熒光鏡觀(guān)察(10×40)要求24小時(shí)內鏡檢完畢,延長(cháng)時(shí)間,熒光亮度下降,影響檢出陽(yáng)性結果,結核桿菌發(fā)黃綠色熒光,亮度清晰,邊緣清楚輪廓正整,菌體典型,細長(cháng)微彎色條均勻。其它物質(zhì)及細菌絕大多數不著(zhù)熒光,但也有少數著(zhù)熒光物質(zhì)呈逗點(diǎn)狀熒光,亮度明暗不均,不規則,邊緣不正齊,易與抗酸菌區別。

(吉林省結核病醫院檢驗科 李桂中供稿)

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