以HB0277硝酸鹽肉湯為例,該培養基用于蠟樣芽孢桿菌的硝酸鹽還原試驗。
1.培養基成分:
成分
含量(g/1000mL)
蛋白胨
5.0
牛肉浸粉
3.0
硝酸鉀
1.0
pH(25℃)7.0±0.1
此培養基需配套HB8282硝酸鹽還原試劑使用。
蛋白胨和牛肉粉提供碳源、氮源、維生素和生長(cháng)因子;某些細菌可利用硝酸鹽產(chǎn)亞硝酸鹽、氨或氮氣。滴加硝酸鹽還原試劑后若試驗菌培養物中有亞硝酸鹽,可與乙酸、對苯氨基苯磺酸和α-萘酚反應生成紅色的N-α-苯胺偶氮苯磺酸。若試驗菌可利用硝酸鹽產(chǎn)亞硝酸鹽進(jìn)一步轉化為氮氣,則小倒管中會(huì )有氣體囤積,判定為陽(yáng)性。若試驗菌可將亞硝酸鹽轉化為氨,則滴加硝酸鹽還原試劑呈無(wú)色反應,此時(shí)需加入適量鋅粉證明培養物中是否有未被利用的硝酸鹽存在,若加入鋅粉后為無(wú)色則證明無(wú)硝酸鹽,則可判斷為陽(yáng)性。試驗菌不利用硝酸鹽,滴加硝酸鹽還原試劑后為無(wú)色,加入鋅粉后變?yōu)榧t色,證明培養物中有未被利用的硝酸鹽被鋅粉還原為亞硝酸鹽產(chǎn)生紅色反應,此時(shí)判斷為陰性。
四、實(shí)驗結果:
按使用方法制備培養基,接種以下質(zhì)控菌株,在35±1℃需氧培養24±2h。
接種量
(CFU)
參比或計
數培養基
生長(cháng)
情況
質(zhì)控菌株
菌株編號
方法
其他特征
蠟樣芽胞桿菌
CMCC63303
>5000
/
定性
+++
+ 紅色
大腸埃希氏菌
ATCC25922
>5000
/
定性
+++
+ 紅色
銅綠假單胞菌
ATCC27853
>5000
/
定性
+++
+ 產(chǎn)氣
單增李斯特氏菌
ATCC219114
>5000
/
定性
+++
- 先無(wú)色,加入鋅粉后紅色
a: 大腸埃希氏菌ATCC25922,b: 銅綠假單胞菌ATCC27853,c:蠟樣芽胞桿菌CMCC63303(培養3d),d: 單增李斯特氏菌ATCC19114
由于某些菌利用硝酸鹽緩慢,可延長(cháng)時(shí)間培養,結果為陽(yáng)性依然可判定為利用硝酸鹽陽(yáng)性。
相關(guān)產(chǎn)品:
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