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    硝酸鹽還原試驗的簡(jiǎn)單介紹

    張文慧
    錄入時(shí)間:2021-8-31 14:36:30 來(lái)源:青島海博生物

    一、培養基用途:

      以HB0277硝酸鹽肉湯為例,該培養基用于蠟樣芽孢桿菌的硝酸鹽還原試驗。


    二、培養基成分及使用方法:

      1.培養基成分:

    成分
    含量(g/1000mL)
    蛋白胨
    5.0
    牛肉浸粉
    3.0
    硝酸鉀
    1.0
    pH(25℃)7.0±0.1

      2.使用方法:
      稱(chēng)取本品 9.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝試管,每管5mL(觀(guān)察產(chǎn)氣需加小倒管),121℃高壓滅菌15min。

      此培養基需配套HB8282硝酸鹽還原試劑使用。


    三、原理:

      蛋白胨和牛肉粉提供碳源、氮源、維生素和生長(cháng)因子;某些細菌可利用硝酸鹽產(chǎn)亞硝酸鹽、氨或氮氣。滴加硝酸鹽還原試劑后若試驗菌培養物中有亞硝酸鹽,可與乙酸、對苯氨基苯磺酸和α-萘酚反應生成紅色的N-α-苯胺偶氮苯磺酸。若試驗菌可利用硝酸鹽產(chǎn)亞硝酸鹽進(jìn)一步轉化為氮氣,則小倒管中會(huì )有氣體囤積,判定為陽(yáng)性。若試驗菌可將亞硝酸鹽轉化為氨,則滴加硝酸鹽還原試劑呈無(wú)色反應,此時(shí)需加入適量鋅粉證明培養物中是否有未被利用的硝酸鹽存在,若加入鋅粉后為無(wú)色則證明無(wú)硝酸鹽,則可判斷為陽(yáng)性。試驗菌不利用硝酸鹽,滴加硝酸鹽還原試劑后為無(wú)色,加入鋅粉后變?yōu)榧t色,證明培養物中有未被利用的硝酸鹽被鋅粉還原為亞硝酸鹽產(chǎn)生紅色反應,此時(shí)判斷為陰性。


    四、實(shí)驗結果:

      按使用方法制備培養基,接種以下質(zhì)控菌株,在35±1℃需氧培養24±2h。

    質(zhì)控菌株
    菌株編號

    接種量

    (CFU)

    參比或計

    數培養基

    方法

    生長(cháng)

    情況

    其他特征
    蠟樣芽胞桿菌
    CMCC63303
    >5000
    /
    定性
    +++
    + 紅色
    大腸埃希氏菌
    ATCC25922
    >5000
    /
    定性
    +++
    + 紅色
    銅綠假單胞菌
    ATCC27853
    >5000
    /
    定性
    +++
    + 產(chǎn)氣
    單增李斯特氏菌
    ATCC219114
    >5000
    /
    定性
    +++
    - 先無(wú)色,加入鋅粉后紅色


    圖1-2  硝酸鹽還原試驗結果

    a: 大腸埃希氏菌ATCC25922,b: 銅綠假單胞菌ATCC27853,c:蠟樣芽胞桿菌CMCC63303(培養3d),d: 單增李斯特氏菌ATCC19114


    五、注意事項:

      由于某些菌利用硝酸鹽緩慢,可延長(cháng)時(shí)間培養,結果為陽(yáng)性依然可判定為利用硝酸鹽陽(yáng)性。


    相關(guān)產(chǎn)品:

    硝酸鹽肉湯-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情


    硝酸鹽還原試劑盒-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情

    注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。


     

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